关于Apo H基因多态性与冠心病及血脂代谢的关系

【摘要】　目的 探讨载脂蛋白Ｈ（Apo H）外显子3、8基因多态性与冠心病(CHD)及血脂代谢的关系。方法 采用聚合酶链式反应结合限制性片段长度多态分析方法，分析了100例健康人及110例冠心病病人的Apo H外显子3，8基因型，并对血脂进行了测定。结果 冠心病组Apo H 外显子3 GG、GA+AA、G等位基因频率、A等位基因频率与对照组比较无差异(X2=1.56～2.15，P&>0.05)；与对照组比较冠心病组Apo H外显子8 GC基因型频率及C等位基因频率显著增高（x2=3.91～8.44，P&<0.05）。冠心病组Apo H 外显子3GG、GA+AA基因型LDL高于对照组（q=3.89，P&<0.05），冠心病组及对照组各基因型间的血脂水平无差别(q=3.37，P &>0.05)；冠心病组外显子8 GG、GC基因型LDL也显著高于对照组（q=4.26，P&<0.05），冠心病组GC基因型的三酰甘油（TG）显著高于GG型及对照组的各基因型(q=4.09，P&<0.05)。结论 APO H外显子3基因多态性与冠心病及血脂代谢无相关性；APO H外显子8 GC基因型及C等位基因与冠心病有关，APO H外显子8基因多态性与TG有关。
【关键词】冠状动脉疾病 载脂蛋白类 基因频率 基因型 高脂血症
　　人类载脂蛋白H(Apo H)具有多态性，它由单一基因位点上的四个不同等位基因所编码，其中有三个常见等位基因即: Apo H*1， Apo H*2， Apo H*3，拷贝出六种表型，即三种纯合体表型(H1/1，h3/2，H3/3)和三种杂合体表型(h3/1，H3/1.H3/2)， Apo H*2是最常见的等位基因。Apo H4仅在黑人中出现，频率为0.1%，为黑人特有的遗传标志[1]。Apo H多态性与三酯甘油代谢及血小板功能有关，因而推测与冠心病可能有一定的关系，但文献报道极少，为此作者以冠心病为研究对象，以健康者为对照，来探讨Apo H外显子3、8基因多态性与冠心病及血脂代谢的关系。
　　1 资料和方法
　　1.1对象 冠心病组110例，男60例，女50例；年龄（62.6±12.4）岁；有陈旧型心肌梗死史或有心绞痛经冠状动脉造影证实患者存在单支、2支或2支以上冠状动脉病变，狭窄程度≥70%，急性心肌梗死或近一个月内用过降脂药物治疗或有严重肝、肾功能障碍者除外。选择100例健康体检者为对照组，其中男60例，女40例；年龄（61.4±13.5）岁。
　　1.2主要器材 DNA浓度测试仪由美国 Beckman公司生产，低温高速离心机由法国Jouan公司生产，STRATAGENE RoboCycler型PCR仪由美国生产。
　　1.3研究方法
　　1.3.1Apo H基因3、8外显子多态性检测 抽取受检者外周静脉血2ml，EDTA抗凝后进行DNA提取。紫外可见分光度仪分别测样品DNA浓度，建立PCR反应体系.
　　1.3.2血脂测定 采用酶法测定血清总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG），CHOD-PAP法测定高密度脂蛋白胆固醇（HDL），低密度脂蛋白胆固醇(LDL)。
　　1.3.3统计学方法 记量资料以x-±s表示。两组人群基因型频率采用基因计数法计算。采用方差分析或卡方检验进行统计处理。 　　2 结果
　　2.1两组Apo H外显子3基因频率的比较 Apo H外显子3基因存在G341A(Ser88Asn)多态，分别为3种基因型：GG、GA和AA，由于GA和AA基因型例数较少，在统计时合并计算。CHD组与对照组的基因型和等位基因频率比较均未见显著性差异（x2=1.56～2.15，P&>0.05）。
　　2.2两组Apo H外显子8基因频率的比较 冠心病组Apo H外显子8 GC基因和C等位基因频率明显高于对照组（x2=3.91～8.44，P&<0.05）。
　　2.3Apo H外显子3基因多态性与血脂水平的比较 与对照组比较，冠心病组GG和GA+AA基因型病人的LDL均有显著性升高（q=3.89，P&<0.05），但同组各基因型间血脂水平无差别(q=3.37，P&>0.05)。
　　2.4Apo H外显子8基因多态性与血脂水平的比较 冠心病组GG与GC基因型病人LDL水平显著高于对照组(q=4.26，P&<0.05)；冠心病组GC基因型病人TG水平显著高于冠心病GG型病人及对照组(q=4.09，P&<0.05)。
　　3 讨论
　　Apo H参与TG的代谢，它的表型影响TG的水平，但 Apo H在血脂中的明确作用并未完全阐明。
　　关于Apo H外显子3，8基因多态性与脑卒中的报道较多，研究发现A等位基因有家族集中分布的倾向，且与脑卒中家族史有关，同时发现G817T（Len247Val）多态性与原发性脑出血组之高血压呈正相关，原发性脑出血病高血压病人G341A型其A等位基因显著高于对照组，故认为G341A型与原发性脑出血发病有关，其原理可能与高血压的介导相关。
　　本研究显示Apo H外显子8基因多态性与冠心病有关，即冠心病患者GC基因型及C等位基因频率增高，GC基因型与C等位基因是冠心病的遗传危险因子。本研究未发现Apo H外显子3基因多态性与冠心病有关，两者的确切关系还需要进一步证实。
参 考 文 献
[1]胡志雄，刘湘林，周杨等.载脂蛋白H的新进展及与心脑血管病的关系[J].中国医师杂志，2004，[增刊]: 340-342.
[2]Sahara DKT，Kristensen， Hamman RF，et al.Melecular basis of the apolipoprotein H protein polimorphism.Hum Genet 1997，100，57-62.转贴于