关于缬沙坦对压力负荷增高性心力衰竭大鼠心肌重塑影响

　　　　　　 作者：蔡智荣 王立宏 巩会平 王成军

【摘要】 目的 探讨缬沙坦对压力负荷增高性心力衰竭（CHF）模型大鼠心肌重塑的影响。方法 采用腹主动脉缩窄法建立CHF模型，随机分为治疗组和模型组，另设同源WKY大鼠为假手术组，每组10只。治疗组口服缬沙坦15 mg/（kg·d），6周后处死所有大鼠，比较各组大鼠心脏左心室质量指数、心肌间质纤维化程度及胶原含量。结果 与假手术组比较，模型组大鼠左心室质量指数、心肌胶原含量均明显增加(F=149.02、5.27，q=23.65、4.27，P&<0.01)；应用缬沙坦6周后，与模型组比较，治疗组大鼠左心室质量指数、心肌胶原含量均显著减少（q=17.07、3.60，P&<0.01）。结论 缬沙坦能够逆转CHF模型大鼠心肌的重塑，从而阻止和延缓心力衰竭发生发展。
【关键词】 心力衰竭，充血性；心室重构；胶原；缬沙坦；大鼠，Wistar
　　［ABSTRACT］ Objective To investigate the effects of valsartan on ventricular remodeling in rats with pressure overloadinduced heart failure. Methods Rat models of congestive heart failure (CHF) were created by coarctation of aorta， which were randomized to treatment group， model group and sham operative group， with 10 rats in each group. The rats in treatment group were given valsartan (15 mg daily)， and all the rats killed after 6 weeks. The left ventricular mass index (LVMI) was calculated and myocardial collagen concentration measured. Results Compared with the shamoperation group， there was significant increase in LVMI and myocardial collagen concentration in model group (F=149.02，5.27;q=23.65，4.27;P&<0.01). After 6 weeks of treatment， LVMI and myocardial collagen concentration in the therapy group was significantly decreased compared with the model group (q=17.07，3.60;P&<0.01). Conclusion Valsartan can block and delay the development of CHF by reversing ventricular remodeling.
　　
　　［KEY WORDS］ heart failure， congestive; ventricular reconstruction; collagen; valsartan; rat， Wistar
　　
　　随着对心力衰竭发生机制认识的不断深入，导致心力衰竭发生发展的基本机制是心肌重塑[1]。肾素血管紧张素醛固酮系统（RAAS）的过度活化在心肌重塑中起关键作用， 血管紧张素受体拮抗剂(ARB)的问世及其在心力衰竭治疗上的广泛应用， 是心力衰竭药物治疗学上的重大进展[2]。ELITE研究显示，ARB类药物氯沙坦对改善心力衰竭相关预后和症状，提高心力衰竭病人的生活质量具有较为理想的疗效[3]。本研究旨在探讨缬沙坦对压力负荷增高性心力衰竭（CHF）模型大鼠心肌肥厚的影响。现将结果报告如下。
　　1 材料和方法
　　1.1 CHF模型的制备
　　
　　选择体质量（BW）150～200 g雄性Wistar大鼠（购于青岛市动物实验中心）共30只，分为假手术组、模型组和治疗组。参照文献[4]的方法并进行改良造模。治疗组在模型组的基础上每只大鼠给予缬沙坦15 mg/（kg·d）(诺华医药公司生产)，假手术组和模型组给予等量生理盐水，连续治疗6周，各组均以标准颗粒性饲料（购自青岛大学医学院动物房）喂养。
　　1.2 左心室质量指数（LVWI）的测定
　　
　　6周后，称取并记录大鼠BW，开胸取出心脏，生理盐水洗净，滤纸吸干，称取左心室质量（LVW），计算LVWI。LVWI = LVW/ BW。
　　1.3 心肌苏木精伊红（HE）染色
　　
　　于左心室游离壁处取部分心肌组织，以40 g/L的甲醛溶液固定，常规石蜡切片，HE染色，光镜下观察。
　　1.4 心肌Van Gieson法胶原染色
　　
　　选取左心室游离壁处部分心肌组织，以40 g/L的甲醛溶液固定，常规石蜡切片，Van Gieson法胶原染色，光镜下观察。
　　1.5 心肌胶原含量的测定
　　
　　应用羟脯氨酸试剂盒检测心肌胶原含量。
　　1.6 统计学方法

　　采用SPSS 11.5 及PPMS 1.5[5]统计软件包进行统计学分析，检测结果均以±s表示，组间比较采用方差分析。　
　　2 结果
　　2.1 心肌肥厚测定
　　
　　与假手术组比较，模型组大鼠左心室质量指数明显增加(F=149.02，q=23.65，P&<0.01)；应用缬沙坦6周后，治疗组左心室质量指数与模型组比较显著下降(q=17.07，P&<0.01)，与假手术组相比差异无统计学意义(P＞0.05)。见表１。
　　2.2 心肌HE染色
　　
　　染色显示，光镜下假手术组心肌细胞形态、胞质、间质、横（纵）纹均正常，肌纤维排列整齐，胞质丰富均匀。而模型组可见普遍肥大的心肌细胞群，心肌细胞排列紊乱，核深染，心肌细胞断裂、溶解、萎缩，炎性细胞浸润；治疗组心肌细胞肥大明显减轻。
　　2.3 心肌Van Gieson法胶原染色
　　
　　Van Gieson法胶原染色显示，模型组心肌纤维束间隙普遍增宽，胶原纤维较粗大，且排列紊乱，分布不均。治疗组纤维化程度虽明显减轻，但仍未能达到正常水平。
　　2.4 心肌胶原的含量
　　
　　与假手术组比较，模型组心肌胶原含量明显增加(F=5.27，q=4.27，P&<0.01)；应用缬沙坦6周后，治疗组心肌胶原含量较模型组明显减少(q=3.60，P&<0.01)。见表1。表1 各组左心室质量指数及胶原含量比较（略）
　　3 讨论
　　
　　本实验采用缩窄腹主动脉，增加心脏后负荷而构建CHF模型[4]。此种造模方法较为简单，实验成本低，动物成活率较高，并且其心力衰竭过程与临床充血性心力衰竭的病理过程较为接近，除造成心脏后负荷直接升高外，尚可激活RAAS，是一种较为理想的心力衰竭造模方法。

　　研究显示，心室重构引起的心肌结构和功能的改变是CHF发生发展的病理基础[6]，而循环系统和局部RAAS的激活是心室重构发生的主要病理机制之一，其中血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）在此过程起主要作用。AngⅡ是一种强力血管收缩物质，是心肌细胞和成纤维细胞生长因子，可促进心肌细胞肥大，促进纤维细胞合成。心肌肥厚虽然是心脏对压力负荷增加的代偿性反应，心肌肥大以及向心性肥厚的心室构型能够暂时降低耗氧和室壁应力，但由于心肌细胞本身已受到严重损害，其最终将发展为离心性肥厚而导致心功能障碍和心力衰竭。因此，心肌肥厚是心血管疾病的独立危险因素，也是增加心血管病病死率和病残率的独立预测因子[7]。本研究病理结果显示，模型组大鼠心肌细胞出现水肿、变性，肌纤维溶解，胶原纤维粗大，且排列紊乱、分布不均，细胞间隙增宽等心肌损伤改变。本研究结果亦显示，模型组大鼠左心室质量指数较假手术组明显增高(P&<0.01)，上述结果提示模型组大鼠左心室质量增加明显，出现了心肌肥厚。
　　
　　心力衰竭治疗的原则是早期用药，阻断心力衰竭的病理基础——心室重构，从而延缓和逆转心力衰竭的发展。以往的研究表明，在治疗CHF 方面，AngⅡ受体拮抗剂并不比ACEI 效果好[8]。然而，近来研究证明，长期ACEI治疗存在组织水平的醛固酮逃逸[7]。研究显示，缬纱坦使心力衰竭血浆醛固酮水平显著并持续至少减少2年。缬纱坦特异拮抗血管紧张素AT1型受体，对AngⅡ 的其他受体亚型无作用，并避免了ACEI 制剂的作用不充分和AngⅡ旁路形成及高肾素水平，在逆转心肌肥厚的发生中具有一定作用[9]。从而降低心脏负荷，改善血流动力学功能，抑制心脏、血管重构，是临床治疗心力衰竭值得探讨的新思路。本研究表明，治疗组应用缬纱坦后左心室质量指数较模型组下降，纤维化程度减轻，胶原含量减少(P均&<0.01)，提示缬纱坦能够抑制心肌细胞肥大和胶原产生，从而抑制左心室心肌重构。
　　
　　综上所述，心肌重塑参与了心力衰竭的发生和发展，而缬沙坦能抑制因心肌纤维明显增生而产生的心室心肌重塑，从而阻止和延缓心力衰竭的发生发展。
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