头孢克肟口腔崩解片质量标准研究

【摘要】 目的 研究头孢克肟口腔崩解片的质量标准。方法 采用桨法及紫外-可见分光光度法测定其溶出度，利用自制崩解装置测定其体外崩解时限;采用高效液相色谱法测定其含量。结果 头孢克肟口腔崩解片的平均崩解时限为38 s，片重差异符合规定;溶出度测定:头孢克肟的pH6.5磷酸盐缓冲液在288 nm波长处有最大吸收，且在3.0～22.5 μg·mL-1浓度范围内与吸光度(A)呈良好的线性关系，回归方程为A=0.0372ρ-0.0056，r=0. 999 5;含量测定:头孢克肟在20～400 μg·mL-1浓度范围内与色谱峰面积(A)呈良好的线性关系，回归方程为A=20.6ρ-76.3，r=0.999 2，平均回收率为100.25%，RSD值为0.70%。结论 本方法专属性强、准确、简便、重现性好，可以有效控制头孢克肟口腔崩解片的质量。

【关键词】 头孢克肟;口腔崩解片;紫外-可见分光光度法;高效液相色谱法;桨法

　Study on the quality standard of cefixime orally disintegrating tablets

　　WANG JinXiang1 ，WANG Yong2

　　(1.Guangdong Food and Drug Vocational College，Guangzhou，Guangdong 510520，China; 2.Guangzhou Baiyunshan Pharmaceutical Co. LTD，Guangzhou，Guangdong 510515，China)Abstract:Objective To study on the quality standard of cefixime orally disintegrating tablets. Methods UV and HPLC were used for identifying the main drug cefixime，oar and UV for its dissolution，selfmade equipement for measuring its disintegration time，and HPLC for its dertermination. Results The average disintegration time was 38 s with satisfied tablet weight variation. The largest absorption of cefixime dissolved in pH6.5 phosphate buffer was observed in 288 nm wavelength，and it has a good linear relationship in 3.0-22.5 μg·mL-1 range with regression equation of A=0.0372ρ-0.0056(r=0.999 5); In 20-400 μg·mL-1 range chromatographic peak area (A) in HPLC has a good linear relationship with regression equation of A=20.6ρ-76.3 (r=0.999 2)，and the average recovery was 100.25% (RSD=0.70%). Conclusion The identification，examination and content determination methods are simple，reliable and can effectively control the quality of the preparations.

　　Key words:cefixime;orally disintegrating tablets;ultraviolet spectrophotometry; HPLC

　　口腔崩解片(orally disintegrating tablets，简称ODT)是指一种在口腔内不需用水即能崩解或溶解的片剂。服用时片剂置于舌面，遇唾液迅速崩解或溶解后，药物即可借助吞咽动力，在数秒至数十秒的时间内入胃起效[1]。ODT与普通制剂相比，有服用方便、吸收快、生物利用度高、对消化道黏膜刺激性小等优点，受到广泛关注，尤其适用于儿童、老人及其他吞咽困难者[2]。

　　头孢克肟(cefixime)，又名世福素，为第三代口服头孢菌素，具有广谱高效、血药浓度高、体内消除半衰期长等特点，临床上主要用于治疗敏感菌所致的咽炎、扁桃体炎、急性支气管炎和慢性支气管炎急性发作、中耳炎、尿路感染、单纯性淋病(宫颈炎或尿道炎)等[3]，制成口腔崩解片后可方便患者使用。

　　ODT是一种新剂型，在《中国药典》2010年版附录“剂型通则”中没有口腔崩解片的有关规定[4]。本研究根据国家食品药品监督管理局药品审评中心发布的《口腔崩解片的剂型特点和质量控制会议纪要》[5]中的规定，结合本制剂特点，并参考头孢克肟片质量标准[6]，通过试验确定了头孢克肟口腔崩解片的质量控制方法，为该制剂的质量控制提供了依据。

　　1 仪器与试药

　　1.1 仪器

　　Sartorius CP225D电子分析天平(德国赛多利斯公司);Agilent 1100高效液相色谱仪;色谱柱为Hypersil C18柱(4.60 mm × 250 mm，5 μm);岛津UV2550型紫外可见分光光度计;ZRS8G智能溶出仪(天津市天大天发科技有限公司);ZB2型智能崩解仪(天津市天大天发科技有限公司);DL360A超声波清洗器(上海金鹏分析仪器有限公司，功率500 W，频率40 kHz)。

　　1.2 试剂与试药

　　头孢克肟口腔崩解片(自制，规格：0.1 g·片-1，批号分别为20091001、20091002、20091003);头孢克肟对照品(自制，批号20090902，以无水物计含量为88.9%，符合要求);乙腈、甲醇和甲酸为色谱纯，其余试剂均为分析纯。

　　2 方法与结果

　　2.1 溶出度测定

　　2.1.1 测定波长的选择 精密称取头孢克肟对照品适量，用pH 6.5磷酸盐缓冲液[取磷酸二氢钾溶液(17→3 500)，用磷酸氢二钠(7→1 000)调pH值至6.5]超声处理使溶解，稀释成每1 mL含头孢克肟10 μg的溶液。按紫外-可见分光光度法(中国药典2010年版二部附录ⅣA)，在200～350 nm的波长范围内进行扫描，得出头孢克肟在288 nm 波长处有最大吸收。另取处方量的辅料溶解过滤后同法测定，结果显示辅料在288 nm的波长处无干扰。因此选用288 nm为测定波长。

　　2.1.2 标准曲线的制备[7，8] 精密称取经105 ℃干燥至恒重的头孢克肟对照品适量，用pH 6.5磷酸盐缓冲液配制成75 μg·mL-1的溶液，摇匀。分别精密量取1、2、3、5、10、15、20 mL置50 mL容量瓶中，用pH 6.5磷酸盐缓冲液定容后摇匀。经0.45 μm 微孔滤膜滤过，在288 nm 波长处测定其吸光度。以吸光度(A)对质量浓度(ρ)进行线性回归，回归方程为A=0.0372ρ-0.0056，r=0.999 5。结果表明头孢克肟在3.0～22.5 μg·mL-1范围线性关系良好。

　　2.1.3 溶出度的测定[6，7] 取本品，按溶出度测定法(中国药典2010年版二部附录ⅩC第二法)，以pH 6.5磷酸盐缓冲液 1000 mL为溶剂，转速为100 r·min-1，温度(37±1)℃，依法操作，分别于5、10、15、20、25、30 min时，取溶液5 mL(每次取液后，均补加pH6.5磷酸缓冲液5 mL)，滤过，精密量取续滤液适量，用pH 6.5磷酸盐缓冲液稀释成每1 mL中约含头孢克肟10 μg的溶液，作为供试品溶液。另取头孢克肟对照品适量，用溶出介质制成每1 mL中含头孢克肟10 μg的溶液，作为对照品溶液。取上述两种溶液，按紫外可见分光光度法(中国药典2010年版二部附录ⅣA)，在288 nm波长处分别测定其吸光度，分别计算每片在各时间点的累积溶出量。3批头孢克肟口腔崩解片累积溶出量结果见表1。由结果可知，当溶出时间为10 min时累积溶出量超过80%，30 min时溶出量超过98%。3批样品的溶出度均符合规定。表1 头孢克肟口腔崩解片累积溶出量

　　2.2 崩解时限[9] 由于本品崩解过快，故无法用普通崩解仪进行测定。按照规定[5]自制体外崩解装置，即10 mL干燥烧杯，悬挂1个自制26目工业筛篮[筛孔内径(710± 24.5)μm]。取本品1片，置已于(37±1)℃水浴中预热的10 mL干燥烧杯的筛网上，滴加(37±1) ℃ 的水2 mL，静置，观察至药片完全崩解并能全部通过26目筛的时限，不得超过1 min。共取3批样品，每批分别测定6 片。结果3批口腔崩解片的平均崩解时间分别为38、42、36 s。

　　2.3 重量差异 参照《中国药典》2010年版附录ⅠA片剂的重量差异检查要求：片重0.25 g，其重量差异限度为±0.75 %。分别检查3批样品重量差异，结果均符合规定。

　　2.4 头孢克肟口腔崩解片的含量测定[6，10]

　　2.4.1 色谱条件 色谱柱Hypersil C18(4.60 mm × 250 mm，5 μm);流动相：以四丁基氢氧化铵(取10%四丁基氢氧化铵溶液25 mL，加水1 000 mL，摇匀，用1.5 mol·L-1磷酸溶液调节pH至7.0)乙腈(体积比80∶20);检测波长：254 nm;流速：1.0 mL·min-1;进样量：10 μL;温度：30 ℃。

　　2.4.2 对照品溶液的制备 取头孢克肟对照品约100 mg，精密称定，置100 mL量瓶中，用pH7.0磷酸盐缓冲液(取磷酸6.8 mL加水300 mL，混匀，用10 mol·L-1的NaOH调节pH至7.0， 加水稀释至

　　1 000 mL，混匀)溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。精密吸取头孢克肟对照品贮备液适量，加pH7.0磷酸盐缓冲液制成每1 mL含头孢克肟200 μg的溶液，即为对照品溶液。

　　2.4.3 供试品溶液的制备 取样品20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于头孢克肟200 mg)，置100 mL量瓶中，加pH7.0磷酸盐缓冲液60 mL，振摇使头孢克肟溶解，再加pH7.0磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液10 mL，置100 mL量瓶中，加pH7.0磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，经0.45 μm 微孔滤膜滤过，即得。

　　2.4.4 阴性对照溶液的制备 除不含头孢克肟外，其余按处方比例制备缺头孢克肟的阴性对照品，按“2.4.2”项下方法制备阴性对照溶液。

　　2.4.5 专属性试验 精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各10 mL，分别注入高效液相色谱仪，按照上述色谱条件进行测定。结果显示阴性对照对头孢克肟测定无干扰。结果见图1。

　　2.4.6 标准曲线的绘制 分别精密量取对照品储贮备液1、2、3、5、10、15、20 mL，置50 mL容量瓶中，用pH 7.0磷酸盐缓冲液溶解并稀释至刻度，摇匀。分别精密吸取10 μL进样，测定峰面积。以峰面积(A)与头孢克肟质量浓度(ρ)进行线性回归，得回归方程为： A=20.6ρ-76.3，r=0.999 2，结果表明头孢克肟在20～400 μg·mL-1范围内，与色谱峰面积呈良好的线性关系。

　　2.4.7 精密度试验 取头孢克肟对照品溶液10 μL，重复进样5次，峰面积的RSD为0.32%。

　　2.4.8 重复性试验 取同一批号的头孢克肟口腔崩解片，称取5份，按“2.4.3”项下方法处理并进样测定，头孢克肟峰面积的RSD为2.02%，表明本方法重复性良好。

　　2.4.9 稳定性试验 按“2.4.3”项下制得供试品溶液，按“2.4.1”项下方法于0、2、4、6、8、12、24 h进样，测得头孢克肟峰面积的RSD为1.88%，表明供试品溶液在24 h内稳定。

　　2.4.10 加样回收率试验 精密称取头孢克肟对照品9份(约45、57、68 mg各3份)，按处方比例加辅料置100 mL容量瓶中，按 “2.4.3”项下自“加pH7.0磷酸盐缓冲液60 mL”后步骤进行制备，依法测定，并计算回收率。结果见表2。

　　2.4.11 样品的测定 取不同批号的头孢克肟口腔崩解片各20片，精密称定，研细，称取适量，按“2.4.3”项下方法处理并按“2.4.1”色谱条件进样测定，以外标法计算样品中头孢克肟的含量。3批样品含量测定结果见表3。表2 头孢克肟加样回收率试验　表3 头孢克肟口腔崩解片含量测定结果

　　3 讨论

　　3.1 供试品溶液配制中溶剂的选择至关重要。本研究分别考察了用甲醇、流动相、pH7.0磷酸盐缓冲液、甲醇溶解后再用流动相稀释至刻度这4种溶液配制方法的分析效果。用甲醇溶解样品所得图谱，主峰前会出现一些干扰峰，影响测定结果;用流动相配制样品溶液，样品较难溶解，即使长时间超声溶解也不完全;用pH7.0磷酸盐缓冲液溶解并稀释至刻度，或用甲醇溶解后再用流动相稀释至刻度分离效果均比较理想，不会出现干扰峰，峰型窄且无拖尾现象。考虑到流动相毒性较大，所以选择pH7.0磷酸盐缓冲液作为供试品溶剂。

　　3.2 头孢克肟几乎不溶于水，故与普通片比较，除进行溶出度测定外，还必须测定崩解时限[5]。

　　3.3 本方法简便、有效、专属性强，为头孢克肟口腔崩解片的质量控制提供了科学依据。

参考文献

　[1] 咸银库，周毅生.口腔崩解片的研究进展[J].广东药学院学报，2006，24(6)：694-696.

　　[2] 翟凌喜，王海刚，凌沛学，等.口腔崩解片质量评价与临床应用研究进展[J].中国新药杂志，2007，16(12)：926-929.

　　[3] 龙明辉.头孢克肟口腔崩解片与胶囊在健康人体内生物利用度比较[J].医药导报，2009，28(6)：702-704.

　　[4] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：2010年版二部 [M].北京:中国医药科技出版社，2010：附录5-6.

　　[5] 国家食品药品监督管理局药品审评中心.口腔崩解片的剂型特点和质量控制会议纪要[C/OL].[2003-09-25] http://www.cde.org.cn/dzkw.do?method=largePage&id=1383.

　　[6] 国家药典委员会. WS1—(X—051)—2003Z.国家药品标准：(头孢克肟片质量标准)[S].

　　[7] 邓小煌，张芳向，张学英，等.头孢克肟分散片的溶出度考察[J].儿科药学杂志，2005，11(5)：15-16.

　　[8] 龚炜，李苑新，赵磊磊，等.头孢克肟缓释片体外释放度的研究[J].广东药学院学报，2006，22(1)：16-18.

　　[9] 姚方耀，刘欢，刘衡，等.口腔崩解片体外崩解评价方法探讨[J].中国药学杂志，2007，42(4)：276-279.

　　[10] 沈健，周建国.高效液相色谱法测定头孢克肟分散片的含量[J].药物鉴定，2008，17(14)：43-18.