【摘要】 目的 探讨自体骨髓浓缩干细胞在股骨颈骨折中的成骨作用。方法 在加压螺纹钉固定股骨颈骨折的基础上，取骼嵴骨髓血进行分离浓缩，获得的浓缩干细胞注射到骨折处。结果 63 例股骨颈骨折57 例得到随防，骨折均愈合，有2 例出现股骨头坏死。结论 骨髓浓缩干细胞有明显的促进骨折愈合作用。骨折类型、复位效果对股骨头坏死影响较大。该方法简单、易操作，有推广价值。
【关键词】 骨折；浓缩骨髓干细胞；移植
Abstract：Objective To discuss the treatment of femoral neck fracture by concentrates stem cellsfrom the body marrow.Methods After thread compression nails fixed femoral neck fracture， the iliac crest marrow blood was taken to carry on the separation concentration，The concentration stem cells was injected to fracture place.Results 57 cases of 63 femoral neck fracture were followedup.2 cases of femoral head avascular necrosis occured.Conclusion Bone marrow concentrates stem cells boost bone union obviously.Femoral head avascular necrosis were related to fracture type，replacement effect.This method is simple，easy to handle and is worthy to extended.
Key words：bone fracture；concentration marrow cell；transplant
随着股骨颈骨折治疗方法增多，出现骨不连和股骨头坏死概率呈下降趋势，由于治疗手段、复位情况、个人技术的不同，各家报道的发生率都不一样。寻求一种治疗股骨颈骨折、避免骨不连和股骨头坏死的有效方法是目前临床研究的热点。近年对骨髓干细胞进行了不少的研究，干细胞的成骨作用得到了肯定［1～3］。临床上也有用骨髓干细胞治疗骨不连的报道［4］。但直接用抽取的骨髓血注入骨不连处，干细胞浓度低，需多次注入，成骨作用显然受到一定影响。如将骨髓干细胞进行浓缩再注入骨折处，成骨作用将大大提高。我院自2002年2月至2006年6月采用加压螺纹钉固定自体骨髓浓缩干细胞治疗股骨颈骨折63 例，在这方面进行了一些研究，取得满意效果。
1 临床资料
1.1 一般资料 本组63 例，男41 例，女22 例；年龄15～30 岁22 例，31～59 岁23 例，60～82 岁18 例，平均40.6 岁。Garden分型：Ⅰ型9 例，Ⅱ型23 例，Ⅲ型21 例，Ⅳ型10 例；其中车祸伤24 例，坠落伤25 例，摔伤14 例。均采用加压螺纹钉固定。Ⅰ型用1枚螺纹钉固定，Ⅱ～Ⅳ型用2枚螺纹钉固定，入院后完善检查后即行手术治疗，陈旧性骨折1 例。Ⅰ型病例在手术同时进行骨髓浓缩干细胞移植，Ⅱ～Ⅳ型固定后5～7 d行骨髓浓缩干细胞移植。
1.2 手术方法及术后处理 骨髓干细胞浓缩操作技术：在全麻或连续硬膜外麻醉下，于双侧髂前上棘或骼后上棘消毒，铺无菌巾。用内径1.5 mm、长6～8 cm穿刺套针穿至松质骨，用20 mL的塑料针管抽吸骨髓。在抽吸的过程中，每次将刺针斜面转动60°，每次抽4 mL左右。完成一整圈的转动抽吸后，再进针1.5 cm，同样的旋转方式吸取骨髓，一个进针点可有几个穿刺方向。可在距原穿刺点4 cm处重新穿刺抽吸直至每侧抽吸75 mL左右骨髓血。抽出的骨髓血放在一个有抗凝剂(内含15 000 U肝素)的无菌袋中。利用密度梯度离心原理对抽集的骨髓血进行快速细胞分选，速度为3 000 r/min，离心5 min，离心力可将较重的多核细胞置于周边，便于从剩余物中分离和收集。无核细胞由于质量较轻而位于中间，将其消除。获取的淡黄层除骨髓干细胞外，还包括其他一些单核细胞，其中一些细胞可能是对临床有用的血管生成素和成骨细胞活素的来源［5］，每150 mL骨髓血可收集浓缩干细胞30 mL。
手术方法：在硬膜外麻醉下，病人平卧在骨科牵引床上，在C型臂X线机透视下，边牵引边复位，患肢内旋15°，一定要透视证实复位效果好；两骨折端移位不超过1/5，个别游离骨块不强求复位，颈干角要求达到正常角度。常规消毒、铺巾、取外侧切口，长5～7 cm。切开皮肤，逐层分离达股骨，剥开骨膜。在大转子顶点下3 cm左右，用配套的导针，按照颈干角130°～135°的角度向股骨头方向旋入，沿导针攻丝后，拧入长度合适的加压螺纹钉，钉尖部达头下0.5 cm。另在第1颗螺纹钉下方1 cm处并与之平行的方向再钻入第2根导针，同样方法拧入加压螺纹钉。C型臂X线机透视螺纹钉位置和复位情况，务必达到上述复位标准，螺纹钉要固定在位。如果是Ⅰ型骨折的病人，采集干细胞和内固定手术同时进行。在做内固定前先采集骨髓，送到另一间手术室进行分离收集，待手术做完马上将采集到的骨髓浓缩干细胞30 mL注入到骨折处。如果是Ⅱ～Ⅳ型骨折，因出血较多，马上行干细胞移植会加重关节囊内压力。5～7 d后出血停止、血肿开始吸收，再行干细胞移植为宜：即在5～7 d后把病人送到手术室，按上述方法采集骨髓干细胞，将收集的骨髓干细胞30 mL在透视下一次注入骨折处。
髓象分析：数字数据通过均数和标准差的形式表达，设定P＜0.05为差异有统计学意义，采用多变量分析手段对个体间的性别、年龄与干细胞间的相关性通过 spearman相关检验来获得。每个病人抽取骨髓数量平均为150 mL，不同个体间骨髓内的有核细胞数目在100～2 400万/mL之间。结果是干细胞的数量与性别无关 (P＝0.26)，但随着年龄的增大而逐渐减少(P＝0.03)，男性干细胞和年龄无相关性 (P＝0.28)，而女性随年龄增长而出现显著的下降(P＝0.04)。
术后处理：术后所有病例不牵引。Ⅰ、Ⅱ型骨折病人术后可在床上活动，Ⅲ、Ⅳ型骨折病人不主张术后马上活动，可作被动的轻微活动，2周后在床上主动活动。Ⅰ型病人8周后撑拐下床活动，3个月弃拐下床活动；Ⅱ型病人3个月撑拐下床活动，6个月弃拐下床活动；Ⅲ、Ⅳ型病人4～5个月撑拐下床活动，8～9个月弃拐下床活动。前3个月每个月摄1次片，2～10个月每两月摄1次片，1年后每半年摄1次片。
2 结 果
有57 例得到随防，随防时间1年至5年，平均3年8个月。骨折愈合时间：2～3个月愈合16 例，4～5个月愈合17 例，6～7个月愈合15 例，8～9个月愈合9 例。有2 例虽然骨折愈合但分别在1年6个月和2年后出现股骨头坏死，均为Ⅳ型骨折，有游离骨块，骨折端移位1/5。坏死的标准是股骨头密度增高不均匀、塌陷。按Harris标准进行评分，优 36 例(63.2％)，良19 例(33.3％)，差2 例(3.5％)，优良率达到96.5％。