甲巯咪唑对Graves病患者外周血清Th1和Th2细胞因子的影响

【摘要】 　　目的 探讨甲巯咪唑对Graves病（GD）患者外周血血清辅助性T细胞(Th)1和Th3型细胞因子的影响。 方法 比较27例初诊GD患者与15例健康者（对照组）血清白细胞介素（IL）12和IL5水平以及IL12/IL5值；GD患者经甲巯咪唑治疗8周后，比较治疗前后血清IL12和IL5水平、IL12/IL5值以及甲状腺功能等的变化。 结果 GD患者治疗前与对照组比较，IL12、IL5及IL12/IL5增高(P<0.05 )。治疗组治疗后与治疗前比较，IL12与IL5水平下降（P>0.05），但IL12/IL5值上升 (P<0.05 )，游离T3和游离T4水平下降（P<0.05或P<0.01），促甲状腺激素上升，甲状腺过氧化酶抗体和甲状腺球蛋白抗体水平下降（P>0.05）；与对照组比较，IL12、IL5及IL12/IL5值仍均增高，其中IL12及IL12/IL5的增高有统计学意义（P<0.05）。 结论 GD患者Th1和Th3型细胞因子IL12及IL5水平增高，经甲巯咪唑治疗后IL12/IL5比值升高。

【关键词】 格雷夫斯病； 甲巯咪唑； Th1细胞； Th3细胞； 细胞因子类； 白细胞介素类

　　CD4+T细胞根据释放的细胞因子类型而分成具有适应性调节能力的细胞亚群辅助性T细胞（Th）1，2和3。Th细胞的表型通过细胞与细胞间接触和释放抑制性细胞因子转化生长因子或白细胞介素（IL）10途径，由T调节细胞介导调节生成Th1或Th3。Th1/Th3的平衡消长是机体免疫反应调节的基本方式。有研究证实，不仅Th3细胞在诱导Graves病（GD）的发病过程中起重要作用，同样Th1细胞也起着重要的作用[12]。IL12是一种Th1型细胞因子，可增强NK细胞和T细胞的细胞毒性作用。IL5是一种Th3型细胞因子，其主要作用是促进B淋巴细胞的生长和分化。甲巯咪唑除了可减少甲状腺激素的合成和释放外，还可起免疫抑制作用。笔者以IL12代表Th1型细胞因子、IL5代表Th3型细胞因子，通过观察甲巯咪唑治疗GD患者后血清IL12和IL5水平的变化，探讨Th1和Th3细胞因子在GD发病中的作用及甲巯咪唑对其的影响。

　　1 对象与方法

　　1.1 对象 病例来自2007年6月-2007年12月本院内分泌科门诊。治疗组27例，为临床初诊GD患者，男性5例，女性22例，年龄（40.4±2.3）岁（31～62岁）；外周血白细胞计数及肝功能正常，无药物过敏史及使用激素等。对照组15例，为体检中心健康体检者，男性2例，女性13例，年龄（43.1±5.5）岁（30～61岁）；排除甲状腺疾病和其它慢性疾病。2组年龄、性别匹配差别无统计学意义。

　　1.2 主要试剂及药物 IL12和IL5试剂盒均为深圳晶美公司产品；采用双抗体夹心ELISA法，严格按说明书进行。促甲状腺激素(TSH)、游离T3(FT3)、游离T4（FT4）、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)及甲状腺球蛋白抗体(TGAb)的检测采用放免法，由厦门第一医院核医学科进行。抗甲状腺药物甲巯咪唑为默克雪兰诺公司产品。

　　1.3 方法 治疗组用甲巯咪唑30 mg，每天1次口服，治疗8周。治疗前后分别留取空腹静脉血，分离血清，检测IL12和IL5水平，以及TSH、FT3、FT4、TPOAb及TGAb水平。对照组入组时留取空腹静脉血，分离血清，并检测IL12和IL5水平。

　　1.4 统计学处理 采用SPSS 13.0统计软件，对所检测的指标先进行正态性检验，符合正态分布的计量资料以x±s表示。治疗组治疗前后的比较采用配对t检验，治疗组与对照组间的比较采用组间t检验。

　　2 结果
　　
　　2.1 血清细胞因子水平的变化 治疗前，治疗组IL12、IL5及IL12/IL5比对照组增高(P<0.05)；治疗后，除IL5外，其余指标增高值与对照组比较差别有统计学意义（P<0.05）。治疗后，治疗组IL12和IL5水平下降，但IL12/IL5比值上升，且与治疗前比较差别有统计学意义（P<0.05)（表1）。

　　2.2 治疗前后甲状腺功能等的变化 治疗后，治疗组FT3和FT4水平下降（P<0.05或P<0.01），TSH水平上升及TPOAb和TGAb水平下降，但差别无统计学意义（表1）。

　　表1 治疗组治疗前后细胞因子和甲状腺功能等的变化及其与对照组的比较（略）

　　Tab 1 Comparison of cytokines levels and thyroid hormones before treatment in treatment group and comparison of cytokines in treatment group and control group

　　IL12:白细胞介素12; IL5:白细胞介素5; FT4:游离T4; FT3:游离T3; TSH:促甲状腺激素; TPOAb:甲状腺过氧化物酶抗体; TGAb:甲状腺球蛋白抗体. 与对照组比较，△:P<0.05； 与治疗前比较，★:P<0.05，★★:P<0.01.

　　3 讨论
　　
　　GD是由促甲状腺激素受体的自身抗体引起的以甲状腺功能亢进为主要临床特征的一种器官特异性自身免疫性疾病[3]。其发病机制目前仍不清楚，目前认为具有某种遗传特征(由自身免疫病相关基因多态性决定)的个体，由于某些内外致病因素刺激或自身免疫应答细胞基因突变及修饰等原因，导致抗原提呈细胞如树突状细胞异常活化、免疫调节网络失衡(Th1/Th3平衡破坏)、自身免疫细胞多克隆活化或凋亡延迟等改变而导致疾病的发生[45]。

　　
　　绝大多数自身免疫应答都有一个共同的关键步骤，即自身反应性Th细胞的活化[6]。机体的CD4+T细胞正常情况下处于前体状态，接受抗原刺激后，CD4+T细胞可迅速分化为Th0细胞，此时IL12与IL5之间的平衡对Th0细胞分化为Th1和Th3亚群起关键的调控作用。Th1型细胞因子主要为炎症性细胞因子，而Th3 型细胞因子则有抗炎症效应。Th1/Th3免疫反应状态是近年来众多疾病的研究热点，而大量关于GD中Th1/ Th3平衡的研究结论不尽一致[711]。大多数的研究结果支持GD的发病可能以Th3 型细胞因子为主，其免疫应答以体液免疫为主，GD患者Th1/Th3细胞因子的比率低于正常组[89]。但Okumura 等发现，GD患者甲状腺内淋巴细胞既有Th1细胞因子也有Th3细胞因子的分泌，未见明显的Th1/Th3细胞因子平衡的偏移[10]。Miyauchi等发现GD患者血清IL12、IL18明显升高，认为Th1型细胞因子可能在GD中起重要作用[11]。也有研究者发现在GD病程的不同阶段Th1和Th3的作用不同[12]。
　　
　　本研究显示，GD患者治疗前IL12、IL5及IL12/IL5均高于健康者，说明Th1和Th3型细胞因子在GD的发病中均发挥了作用。经治疗后，IL12和IL5水平下降，IL12/IL5比值上升。GD患者治疗后IL12、IL5及IL12/IL5值仍高于健康者，除IL5值增高无显著性外，其余则差别有统计学意义。这种血清IL12水平的增高更加突出了Th1型免疫应答在炎症反应中的作用，这与文献报道一致[13]。本研究还发现，在治疗前甲状腺激素和血清IL12水平升高，当治疗后甲状腺激素水平和血清IL12的水平同时下降；另外，治疗后血清IL12和IL5水平均下降的同时IL12/IL5的值反而上升，推测原因可能与疗程的长短有关[5，14]。至于血清IL12水平与甲状腺激素等的确切关系还有待进一步研究。
　　
　　笔者认为，IL12和IL5在GD发病机制中起着重要的作用，是参与GD发病的重要免疫学指标；甲巯咪唑可促使GD患者血中IL12、IL5及IL12/IL5的改善，有助于GD免疫平衡紊乱的恢复。

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