【摘要】 过敏性紫癜为儿科常见病、多发病，过敏原的检测在过敏性紫癜病因诊断中有重要的意义。能诱发过敏性紫癜的过敏原主要包括吸入性过敏原和食物性过敏原，过敏原检测的方法概括为体内实验及体外实验两类。为提高过敏原检测的特异性及敏感性，需结合患儿年龄、季节、气候、地域、生活环境等特点，选择适当的过敏原种类及方法。
【关键词】 紫癜，过敏性/预防与控制; 过敏原/致病力; 紫癜，过敏性/尿; 过敏原检测; 儿童
过敏性紫癜(HenochSchonlein purpura，HSP)是以小血管炎为主要病变的系统性血管炎。其临床特点是非血小板减少性紫癜、关节肿痛、腹痛、便血、血尿和蛋白尿。HSP为儿科常见病、多发病，多发生于2～8岁的儿童，好发于冬春二季。尽管部分患儿病情可以自然恢复，但约有1/3的患儿频繁复发，加重肾脏的损害。而HSP的病因及发病机制尚未完全阐明，诱发因素复杂多样，近年来研究认为过敏因素在HSP的发病中起着一定的作用，尽可能寻找并避免过敏原，对防止HSP有重要意义[13]。
1 儿童HSP常见过敏原
能诱发HSP的过敏原有很多种，主要通过吸入、食入等方式使机体致敏。
1.1 吸入性过敏原 主要分为室内过敏原和室外过敏原。(1)室内过敏原：①室内尘土类过敏原，主要包括人类的上皮脱屑、动物皮毛及脱屑、尘螨和分泌物、真菌及其代谢产物、棉花纤维、植物纤维等;②屋尘螨:以人体脱落的皮屑为食物，主要寄生于卧室的床铺、地毯、沙发等处，尤其在沿海潮湿地区易孳生;③真菌:主要致敏的菌种包括交链胞霉属、青霉、毛霉、曲霉、黑根霉和镰刀霉等，其中交链胞霉及其分支胞属是空气中传播量最大，致敏性最强的真菌，在热带、潮湿多雨和海拔较低的地区，周围环境及居室内容易孳生;④蟑螂:被认为是引起过敏性疾病的主要过敏原;⑤动物皮毛和分泌物:家中篆养的猫、狗、兔、鸟等宠物的分泌物、皮屑和脱毛等均可成为过敏原。(2)室外过敏原:花粉，主要指以风为传播媒介的气体花粉。①春季花粉，国内南方的春季花粉飘散季节在2～5月份，花粉种类以枫杨属、桉属、松属及柏科为主;北方的春季花粉飘散季节在4～6月份，花粉种类以杨属、松属、榆属、柳属为主;②夏季花粉，飘散季节在6～8月份，花粉种类主要有玉米、高粱、小麦、莎草、藜科等植物花粉;③秋季花粉，飘散季节以8～10月份为主，花粉种类主要包括杂草花粉和禾本科植物花粉，如豚草属、嵩属、藜科等。国内南方的秋季花粉以禾本科植物花粉为主，而北方以嵩属花粉为主。豚草花粉在北美国家是重要的致敏花粉。
1.2 食物性过敏原 (1)过敏性食物：常见的过敏性食物有八大类：鸡蛋、牛奶、鱼、贝壳类海产品、坚果(胡桃、腰果)、花生、黄豆、小麦，可引发90%以上的过敏反应;还有牛肉、猪肉、羊肉、鸡肉、玉米、芝麻、草莓和菠萝等不常见的过敏食物。(2)食品添加剂过敏原：食品添加剂中的香料、色素、抗氧化剂、防腐剂等均可导致过敏反应，其中以色素、香料引起的过敏反应最为常见。
2 过敏反应类型
2.1 Ⅰ型过敏反应 临床上大多数的过敏反应是Ⅰ型过敏反应，又称速发型过敏反应。介导Ⅰ型过敏反应的过敏原分布较广，目前临床上能够检测的过敏原有数十种，包括吸入性过敏原和食物过敏原。Ⅰ型过敏反应发作迅速，多为接触过敏原数分钟到1 h内发生，由肥大细胞和IgE介导。变应原进入体内，刺激单核吞噬系统，引起浆细胞反应，产生特异性IgE，与肥大细胞或嗜碱性粒细胞表面IgE受体桥联，使这些细胞处于致敏状态。当致敏的肥大细胞再次暴露于致敏物质，则引起肥大细胞脱颗粒，释放介质，引起一系列过敏症状。
2.2 Ⅲ型过敏反应 又称延迟型过敏反应，多为接触过敏原数小时到数天后发生，由IgG介导。研究发现，食物可成为过敏原诱发IgG介导的延迟型过敏反应，而且常为喜食的食物[46]。其致病机制是免疫系统把进入人体内的某些食物当作有害物质，针对其产生过度性免疫反应，产生食物特异性IgG抗体，IgG抗体与食物颗粒形成免疫复合物(Ⅲ型变态反应)，可能引起所有组织(包括血管)发生炎症反应，并表现为全身各系统的症状。目前也将这种由IgG介导的食物过敏反应称为食物不耐受。
3 过敏原检测方法
3.1 体内方法 包括皮肤试验、激发试验、过敏原激发试验等。激发试验和过敏原激发试验在HSP患儿中应用较少，主要应用于哮喘患儿。
3.1.1 皮肤试验的原理 皮肤试验是最常用的体内方法，也是诊断IgE介导的变态反应性疾病的主要检测方法。其基本原理是当某种过敏原进入皮肤时，对某些物质有速发型过敏反应的患儿，立即特异性地引起皮肤内的肥大细胞脱颗粒，释放组胺等活性物质，导致局部毛细血管扩张(皮肤红斑)，毛细血管通透性增强(皮肤水肿、风团)。依据皮肤反应的出现和程度来可确定过敏原。
3.1.2 皮肤试验的方法 包括皮肤点刺试验、皮内试验及皮肤斑贴实验，其中皮肤点刺试验最常用。(1)皮肤点刺试验(skin prick test，SPT)：SPT是将少量高度纯化的过敏原液体和对照液体(组胺)分别滴于患儿前臂，再用点刺针垂直轻轻刺入皮肤表层，维持1秒钟后拔出。如患儿对该过敏原过敏，则会于15 min内在点刺部位出现类似蚊虫叮咬的红肿块，出现痒的反应，或颜色上有改变。该方法采用组胺作阳性对照，计算相对的反应强度，15～20 min观察结果。阳性结果判断标准以过敏原及阳性对照液(组胺)所致风团面积比而定其反应级别。SPT具有安全、灵敏度高、操作简单、设备简备、检测时间短，一次试验可测定多种过敏原等优点，与临床过敏性疾病的相关性好，但特异性不够。(2)皮内试验：只在皮肤点刺试验阴性而无更高浓度的过敏原提取物可供使用时才进行。操作方法：用1 mL注射器在皮内注入0.02～0.04 mL过敏原皮试液，使之形成一个直径3～4 mm大小的皮丘。15～20 min观察结果，阳性反应表现为注射处皮肤风团和红晕。(3)皮肤斑贴实验：主要用于接触性皮炎患儿的过敏原诊断，成人应用较多，儿童较少使用。使用方法：将包被过敏原的贴片贴于健康、无毛发的皮肤部位，推荐采用部位为背部上方、脊柱左侧和(或)右侧。
3.1.3 皮肤试验需注意的问题 皮肤试验受多种因素影响，不可避免的存在假阳性和假阴性反应，皮肤试验前应详细询问用药史及过敏史，以确保试验的安全及检查结果的可靠。通常在皮肤试验前需停抗组胺药3 d以上，少数抗组胺药(如阿司米唑)需停用3～4周;应用酮替芬者，需停药2～3 d;长期、高剂量糖皮质激素的使用对结果的判定有影响，应在病情允许情况下减量。如为高度敏感状态者及已经明确严重的食物过敏者禁做皮肤试验，HSP患儿在疾病的急性发作期不适合应用皮肤试验检测过敏原，但是对于频繁复发的HSP患儿，在疾病的间歇期可以应用皮肤试验方法检测过敏原。
3.2 体外方法 主要是检测患儿血清过敏原特异性IgE(sIgE)、食物过敏原特异性IgG。其在HSP患儿中应用最多，与皮肤实验比较，体外方法绝对安全、不受皮肤疾病、药物影响，并且为定量。
3.2.1 IgE的检测 包括血清总IgE和sIgE检测。目前测定总IgE、sIgE的方法主要包括双抗体夹心法、放免吸附试验、酶联免疫试验、荧光酶联免疫分析、线性分析、生物芯片、免疫捕获分析、化学发光法等。影响总IgE水平的因素很多，如患儿年龄、性别、种族、寄生虫感染等，因此总IgE水平高不一定是过敏性疾病患儿，而过敏者总IgE水平不一定高。sIgE有很好的敏感性和特异性，CAP过敏原检测系统测定方法[7]在临床上应用较多，CAP检测系统为Pharmacia Diagnostics AB产品，包括：仪器(UniCAP 100)、软件(UniCAP 100 RM5.00)。5 种过敏原：尘螨(d1/d2)、蒿属花粉(w5/w6)、蓉草花粉(w22)、猫毛(e1)、链格孢霉(m6)及其他配套的CAP诊断试剂。其基本原理为荧光酶联免疫分析，过敏原包被在一种称为CAP的固相载体中，该系统定量检测的sIgE浓度水平分为7个级别。
3.2.2 食物过敏原特异性IgG的测定 检测食物过敏反应的方法较简单，目前多采用酶联免疫法半定量检测血清中食物过敏原特异性IgG。可以检测包括鱼、蛋清/蛋黄、牛奶、牛肉、虾、大豆、花生7项食物特异性IgG;14项组合可以检测牛肉、鸡肉、鳕鱼、玉米、蟹、蛋清/蛋黄、蘑菇、牛奶、猪肉、大米、虾、大豆、西红柿、小麦等14项食物特异性IgG;90项组合可以检测粮食类、水果类、肉蛋类、蔬菜类、奶制品类、调料类、坚果类、海鲜类、巧克力类、酵母类等90项食物特异性IgG。检测的食物特异性IgG浓度水平分为阴性、轻度敏感、中度敏感、高度敏感4个级别。
4 过敏原检测方法的评价
HSP患儿过敏原检测是有效控制HSP复发的重要方面，虽然临床上有许多的过敏原检测方法可供选择，但在具体应用上有很多环节需要把握。 体内方法检测过敏原可以提供最为直接的依据，如：SPT简便易行，但常常需要多点针刺，对患儿造成的痛苦较大;患儿有较严格的条件限定，如：没有皮肤病变，未使用过对皮肤反应有影响的药物，实验物质必须保证除过敏原特性外不具毒性。体外实验方法较体内实验方法更安全和符合伦理，但是没有一种单一的试验能保证其结果的准确。体内和体外实验应该互为补充，以得到准确的特异性诊断。如：对于IgE介导的食物过敏，要结合sIgE及SPT判断，如果两者不一致，需要通过双盲安慰剂食物激发试验来确定过敏原。
在过敏原检测方法中有单一过敏原试验和过敏原筛查试验。单一过敏原试验只能回答具体的单一过敏原测定结果，而大部分患者并非只对某单一的过敏原有反应，往往可能对多种过敏原过敏;此外临床上常存在病史采集不详或缺乏特异性过敏病史等情况，在选择检测过敏原的种类时很困难，因此目前临床上通常选用多种过敏原混合体系进行筛查。如筛查试验为阴性可不考虑单项过敏原检测，如筛查阳性可进一步进行单项过敏原测定。
在选择检测过敏原的方法及种类时，还需结合患儿的年龄、季节、气候、地域、生活环境等特点，以提高过敏原检测的特异性及敏感性。
参考文献
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