关于抗CCP抗体与RF联合检测在类风湿关节炎早期诊断中的临床意义

作者：杨鹏 张静 刘杨 郑丹 王立军 王洋

【摘要】目的 评价抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体和类风湿因子（RF）两者单独和联合检测在类风湿关节炎（RA）早期诊断中的意义。方法 抗CCP抗体检测采用ELISA法、RF检测采用速率散射比浊法，检测64例RA（类风湿关节炎）患者和27例非RA患者及40例健康对照组的抗CCP抗体和RF，分析抗CCP抗体、RF单独及两者联合检测的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值。结果 抗CCP抗体诊断RA的敏感度为70.3％ ，RF诊断RA的敏感度为73.4％ ，两者无显著性差异。抗CCP抗体诊断RA的特异度为95.5％ ，RF诊断RA的特异度为79.1％ ，两者有显著性差异。两者联合检测可提高敏感度至90.6％，特异度下降至77.6％ 。结论 抗CCP抗体对RA的诊断敏感度与RF相当，但特异度较RF明显增高，若两者联合检测可极大提高敏感度，有助于早期诊断RA。
【关键词】抗CCP抗体 RF RA
　　类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种常见的以对称性的关节滑膜炎症为主要临床表现的慢性致残性系统性自身免疫性疾病，在出现症状2年内即出现不可逆的骨关节损害[1]。如果采用目前国际上通用的美国风湿病学会（ARA）于1987年制定的RA分类标准诊断，往往已是其病后的1-2年或更长时间，此时已出现不可逆的关节损害。所以，选择敏感性及特异性较好，且简便实用的检测指标将有助于临床应用并减轻患者负担[2]。2000年，国外报道了用ELISA法检测血清抗环瓜氨酸肽（cyclic citrullinated peptide，CCP）抗体对RA有较好的敏感性和特异性[3]。本文应用ELISA法检测患者血清中的抗CCP抗体，并通过与类风湿因子(rheumatoid factor，RF)的比较，旨在探讨两者联合检测在RA诊断中的临床价值，为RA的早期诊断提供帮助。
　　1 材料和方法
　　1.1 研究对象
　　2010年10月-2011年4月在本院住院和门诊治疗的RA患者64例，其中男性17例，女性47例，平均年龄(42±10)岁，临床诊断均符合美国风湿病学会1987年修订的诊断标准。非RA组27例，其中男性10例，女性17例，平均年龄(40±15)岁。其中，系统性红斑狼疮患者8例，骨性关节炎患者5例，痛风患者5例，干燥综合征患者2例，其它结缔组织病患者7例，其临床诊断均符合国际和国内的诊断标准。健康对照组40例，来自本院体检的健康人员，其中男性15例，女性25例，平均年龄（35±12）岁。三组的年龄与性别构成比差异均无统计学意义(P&>0.05)，具有可比性。
　　1.2 标本采集
　　所有研究对象均于晨起抽取肘静脉血3mL，自然凝固后分离血清置于-20℃低温保存统一检测。（所用样本均无溶血和高脂血清、高胆红素血清）
　　1.3 检测方法
　　1.3.1 抗CCP抗体测定：采用ELISA方法定量测定病人血清中抗CCP IgG类抗体，试剂由上海富莼科芯生物技术有限公司提供，按照说明书进行操作，结果以≥25 RU/mL为阳性，酶标仪为奥地利SUNRISE酶标仪。
　　1.3.2 RF测定：采用速率散射比浊法，试剂及标准品为美国Berkman公司产品，按照说明书进行操作，定量测定病人血清中RF的含量，结果以≥20IU/mL为阳性。
　　1.4 统计学分析
　　采用四格表计算抗CCP抗体和RF的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。数据采用SPSS12.0软件进行统计学分析。利用χ2检验对率进行比较，P&<0.05为有统计学意义。
　　2 结果
　　2.1 抗CCP抗体、RF测定及两者联合检测的阳性率
　　抗CCP抗体、RF测定及两者联合检测的阳性率分别为70.3％ 、73.4％ 、90.6％（检测结果见表1）。经检验，RA组的阳性率明显高于非RA组和健康对照组(P&<0.05)。
　　表1 抗CCP抗体、RF及两者联合检测阳性率(例，％)
　　
　　2.2 抗CCP抗体、RF及两者联合检测敏感度和特异度比较 　　 抗CCP抗体诊断RA的敏感性较RF低，差异无统计学意义(P&>0.05)。特异性比RF高，差异有统计学意义(P&<0.05)（检测结果见表2）。抗CCP抗体和RF联合检测可提高诊断的敏感度和阴性预测值。
　　表2 抗CCP抗体、RF和两者联合检测敏感度和特异度比较(％)
　　
　　注：灵敏度指检测方法与诊断的符合率；特异度指检测方法与诊断的排除率。
　　3 讨论
　　目前RA的诊断主要依靠临床表现、X线改变和RF检测，符合此标准的患者常已经出现关节破坏，丧失最好的治疗时机。随着RA的治疗策略从单纯控制症状过渡到早期干预、阻断疾病进程，因此早期诊断显得尤其重要。但是，现行的诊断标准仍参照1987年美国风湿病学会的分类标准，并且其中多为临床诊断指标，实验室指标RF目前临床应用广泛，RF是γ球蛋白抗体（主要是IgM类抗体），它的阳性率为60%-80%，但其他自身免疫性疾病患者血清中也可检测出RF，特异性较差，在本研究中，RF在非RA组及健康对照组中分别有40.7%和7.5%的阳性率，因此，如果临床症状不典型，通过RF检测将很难为早期诊断RA提供可靠的依据。近年来，随着人们对RA抗体谱的不断认识，提出了瓜氨酸相关自身抗体系统，包括抗核周因子(APF)、抗角蛋白抗体(AKA)、抗聚角蛋白微丝蛋白抗体(AFA)[4]。进一步研究表明，这些抗体有共同的抗原决定簇-瓜氨酸，2000年由Schellekens等将1条由19个氨基酸残基组成的瓜氨酸肽链的2个丝氨酸替换为半胱氨酸，形成与β2转角具有相似结构的二硫键，合成环瓜氨酸肽（CCP）[5]。目前通过人工合成高纯度CCP为抗原建立酶联免疫吸附实验(ELISA)方法，用于临床检测RA，该方法更易于判断结果，便于临床推广和应用[6]。国内学者研究，抗CCP抗体对RA诊断的敏感度为40%-85％ 、特异度为94%-98％[7，8]。我们通过检测，抗CCP抗体对RA诊断的敏感度为70.3％，特异度为95.5％。与国内外报道的结果基本相符。若抗CCP抗体与RF联合检测，则能极大地提高诊断RA的敏感度，达到90.6%，并使阴性预测值达到89.7%。另有研究表明，抗CCP抗体可能与类风湿关节炎的活动性相关，抗CCP抗体阳性的类风湿关节炎患者的骨破坏比阴性患者更严重，抗CCP抗体的含量与类风湿关节炎的病情严重程度及发展有关，浓度的高低可有助于判断预后，浓度高往往提示预后不佳，发生关节侵蚀的危险性大[9，10]。因此，抗CCP抗体不但对早期RA的诊断有一定帮助，而且在某种意义上对判断疾病的严重程度也有一定的作用。
　　综上所述，抗CCP抗体诊断RA的灵敏度较RF低。但抗CCP抗体诊断RA的特异度较RF高，并对判断RA的预后有一定的作用。将两者联合作为RA的早期诊断指标，结合临床症状可对提高RA的早期检出率有一定的帮助。
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