福建省宁德市青山岛居民幽门螺杆菌感染率及细菌耐药率调查

　　　　 作者：陈明红， 林志辉， 彭孝纬， 潘秀珍

【摘要】 　　目的 调查福建省宁德市青山岛居民幽门螺杆菌(Hp)感染率，了解该地区Hp菌株耐药率并与福建省立医院门诊病人菌株耐药率比较。 方法 用13C尿素呼气试验检测有无Hp感染。对感染者行胃镜检查，胃黏膜活检培养Hp菌株。用E试验法和琼脂稀释法检测阿莫西林、克拉霉素、甲硝唑的耐药性。 结果 该地区的Hp感染率为52.5%，存在家庭聚集现象。感染率随着年龄增长而增加。其Hp菌株甲硝唑耐药率为11.4%，克拉霉素耐药率为5.7%，无阿莫西林耐药菌株。福建省立医院门诊病人Hp菌株甲硝唑耐药率66.7%，克拉霉素耐药率为26%，无阿莫西林耐药菌株。 结论 由于无抗生素滥用，宁德市青山岛Hp对克拉霉素、甲硝唑耐药率明显低于福建省立医院门诊福州市区病人。

【关键词】 螺杆菌 幽门 螺杆菌感染 抗药性 细菌 药物耐受性 福建

　　福建省宁德市青山岛地处边远，居民以捕鱼为生，患胃肠疾病时很少就医，无抗生素滥用情况。笔者调查该地区幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)感染率及细菌耐药率，并与福州市近年来的耐药情况进行比较，探讨抗生素使用状况对Hp耐药率的影响。

　　1 对象与方法

　　1.1 对象

　　1.1.1 海岛居民 按家庭进行编号，随机抽取147户家庭，562例居民。其中男性269例，女性293例，年龄（38±12.2）岁（3～68岁）。

　　1.1.2 福建省立医院门诊病人 随机抽取2001年3月-2006年10月因上消化道疾病在本院行胃镜检查的福州市区病人101例，年龄（47±15.4）岁（11～73岁）。未行过Hp根除治疗。

　　1.2 仪器 Etest试剂盒（Biochem公司）；快速尿素酶实验试剂盒（三明三强生物化工有限公司)；红外能谱仪（IRIS，德国Wagner公司）。

　　1.3 方法

　　1.3.1 13C尿素呼气试验 隔夜空腹收集气体100 mL，将13C尿素75 mg溶于15 mL橙汁中，1 min内服下，30 min后收集样本气10 mL，将以上2气袋与IRIS的检测孔相连，点击测定，选择相应的检测孔，IRIS自动完成测定，并打印出检测结果。

　　1.3.2 Hp菌株的分离培养 取胃窦部黏膜1块，将标本放入含有布氏肉汤的输送液中，匀浆法接种于在含7%羊血的脑心浸液培养基，在微需氧环境下（5%O2，10%CO2，85%N2）培养3～6 d。通过肉眼观察菌落形态，革兰氏色镜检，尿素酶、过氧化氢酶实验鉴定为Hp菌株后，挑取生长良好的菌株转至新的培养基上进行传代培养2 d，将菌株混悬于30％甘油布氏肉汤中，－70 ℃保存备用。

　　1.3.3 耐药性检测 采用Etest和琼脂稀释法[1]，收取培养48～72 h的新鲜菌株于脑心浸液中，将其稀释至3×108mL-1，吸取100 μL稀释好的菌液，滴加至90 mm平板上，用L棒均匀涂开，晾后放置含抗生素的Etest试纸条，于37 ℃微需氧环境中，培养72 h后，抑菌环和试剂条交界处的刻度细菌即为最低抑菌浓度值(minimal inhibitary concentration，MIC)。甲硝唑MIC≥8 mg／L，克拉霉素MIC≥2 mg／L，阿莫西林MIC≥1 mg／L判定为耐药。琼脂稀释法是将不同稀释浓度(2倍稀释)的抗生素加入MH含血培养基中，倾注平板，注明药物浓度，吸取100 μL稀释好的菌液(3×108 mL-1)，在平板上均匀涂开，微需氧、37 ℃条件下培养2～3 d。能抑制该菌生长的琼脂稀释平板的最低浓度即为MIC值。

　　1.4 统计学处理 采用SPSS 13.0软件，样本率之间的差异以χ2检验比较，P<0.05为差别有统计学意义。

　　2 结果

　　2.1 Hp感染率 该岛居民的Hp感染率为52.5%，男性感染率为50%，女性感染率为54.4%。各年龄组Hp感染率如下：<5岁为10.2%，6～10岁为42.5%，11～20岁为56.3%，21～30岁为59.2%，31～40岁为61.3%，41～50岁为51.6%，51～70岁为53.8%。Hp感染率随着年龄的增长而增加（图1）。
　　图1 岛上居民幽门螺杆菌感染率与年龄的关系（略）

　　Fig 1 The prevalence of H pylori infection on the island increased with age

　　2.2 Hp感染存在家庭聚集现象 受调查家庭分为3组，1组为家庭中父母亲均无Hp感染，2组父母亲均有Hp感染，3组为家庭中父母有一方受感染。各组间Hp感染率经χ2检验存在明显差异（表1）。

　　表1 儿童Hp感染率与其父母感染状态的关系（略）

　　Tab 1 Percentage of children infected with H pyloriaccording to infection of parents

　　Hp：幽门螺杆菌.

　　2.3 Hp耐药率 检测岛上居民Hp对甲硝唑、克拉霉素及阿莫西林的耐药率，并与2006年在福建省立医院门诊病人Hp菌株耐药率比较（表2）。岛上居民Hp对克拉霉素、甲硝唑耐药率明显较福建省立医院门诊(福州市)区病人低（χ2检验，P<0.05）。

　　表2 福建省立医院门诊病人与岛上居民幽门螺杆菌菌株耐药率比较（略）

　　Tab2 H pylori strains antibiotic resistance in Fujian provincial Hospital and on the island

　　表中数据为例数（%）. 与岛上居民菌株比较，☆：P<0.05.

　　3 讨论

　　3.1 Hp感染率与年龄的关系 Hp的感染率在不同的国家类型不同。在发展中国家，儿童的感染率很高。而在发达国家，只有少部分儿童感染Hp，但在成长过程中，Hp感染率逐渐升高[2]。本研究数据提示，岛上居民＜5岁的儿童Hp感染率仅为10.2%，但6～10岁年龄的儿童Hp感染率剧增为42.5%，之后缓慢上升，31～40岁年龄组Hp感染率达到高峰（61.3%），40～70岁年龄组再出现个平台期，符合发展中国家Hp感染率的类型。其主要原因可能与该岛居民的生活卫生条件较差，儿童在较短的生活时期内便感染Hp。Hp的感染途径至今尚未完全阐明。人群的卫生条件、受教育程度和社会地位与Hp感染率的高低有关。在本研究群体中，这些因素是相似的。对家庭中的Hp感染率调查结果显示，在父母亲均感染Hp的家庭中，其子女的Hp感染率为82.4%。而父母亲均无感染Hp的家庭中，其子女的Hp感染率为38.5%，说明密切的生活接触能够提高Hp的感染机会。

　　3.2 抗生素的使用状况对Hp的耐药率的影响 近年来，由于Hp的耐药性直接影响Hp根除的成败[3]，故耐药率问题得到广泛重视。有证据表明抗生素的使用状况对Hp的耐药率有直接的影响[4]。在不同地区，Hp的耐药率差异很大。发达国家对甲硝唑的耐药率在10～50%，而发展中国家达90%。多数国家对克拉霉素耐药率在2～15%[5]。多数研究表明所有Hp对阿莫西林敏感，但Kim等发现了5株阿莫西林耐药菌株[6]。本研究中，该岛居民Hp对甲硝唑的耐药率为11.4%，克拉霉素耐药率为5.7%，明显低于福州地区患者，可能与该岛居民使用抗生素少有关。

参考文献

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　　[3] 成 虹，胡伏连，谢 勇，等. 中国幽门螺杆菌耐药状况及耐药对治疗的影响全国多中心临床研究[J]. 胃肠病学，2007，12，（9）：525530.

　　[4] McMahon B J，Hennessy T W，Bensler J M，et al. The relationship among previous antimicrobial use，antimicrobial resistance，and treatment outcomes for Helicobacter pylori infection[J]. Ann Int Med， 2003，139(6)：463469.

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　　[6] Kim J M，Kim J S，Jung H C， et al. Distrbution of antibiontic MICs for Helicobacter pylori strains over a 16year period in patient from Seoul，South Korea[J]. Antimicrob Agents Chemotter， 2004，48(12):48434847