绝经后乳腺癌CerbB2、ER和PR表达及预后相关分析

　　　　 作者：宋卫，陆肖玮，丁云，毛锦峰

【摘要】 　　目的：探讨绝经前和绝经后雌激素受体(estrogen receptor， ER)、孕激素受体(progesterone receptor， PR) 和CerbB2基因在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌临床病理特征和预后的关系。方法: 采用免疫组织化学SP法检测253例乳腺癌组织中ER、PR及CerbB2的表达；回顾性分析89例绝经组患者乳腺癌的病理诊断学资料。结果: (1)绝经前和绝经后患者的CerbB2、ER、PR的阳性率差异无统计学意义。(2)绝经前CerbB2阳性患者的ER阳性率显著低于CerbB2阴性患者（P＜0.05），PR阳性率在CerbB2阳性和阴性患者中无显著差别；绝经者中，CerbB2阳性患者的ER、PR阳性率均显著低于CerbB2阴性患者（P＜0.05）。(3)多因素分析显示，ER、PR表达均与组织分型无关（P＞0.05）；CerbB2的表达与组织分型有关（r为0.022， P＜0.05）。ER的表达与淋巴结转移无关(P＞0.05)；PR与淋巴结转移呈负相关（r=0.23， P&<0.05）；cerbB2与淋巴结转移呈正相关(r=0.605，P&<0.05)。ER的表达与生存时间无相关性(r=0.100，P &>0.05)； PR与CerbB2的表达与生存时间有相关性(r分别为0.147、0.605，P&<0.05)。结论: 联合检测乳腺癌组织中ER、PR和CerbB2的表达对乳腺癌患者治疗方案的制定和判断预后有重要意义。

【关键词】 乳腺癌；CerbB2；雌激素受体；孕激素受体；预后

　　［ABSTRACT］ Objective: To investigate the expression of CerbB2， estrogen receptor (ER)， progesterone receptor (PR) in premenopausal and postmenopausal patients with breast cancer， and to explore their prognostic implications and relationship with pathological characteristics of the cancer. Methods: ER， PR and CerbB2 expression in 253 breast cancer cases were detected with immunohistochemical SP method; pathological diagnostic data of 89 postmenopausal breast cancer patients were retrospectively analyzed. Results: (1) Positive rate of ER， PR， CerbB2 was not significant different between premenopausal and postmenopausal patients. (2) For premenopausal patients， those with positive CerbB2 showed significant lower ER positive rate than CerbB2 negative patients (P&<0.05)， but no similar significance was found in PR positive rate. For postmenopausal patients， positive rates of both ER and PR were significant lower in CerbB2 positive patients than that in CerbB2 negative patients (P&<0.05). (3) Multivariate analysis showed ER， PR expression was not correlated with the histological characters of breast cancer (P&>0.05); but CerbB2 expression was related to the histological types (r = 0.022， P &<0.05). ER expression and lymph node metastasis was not related (P&> 0.05); however PR was negatively correlated (r = 0.23， P&<0.05)， and cerbB2 was positively related with lymph node metastasis (r = 0.605， P&<0.05). ER expression was not correlated with patients' survival time (r = 0.100， P&> 0.05) but PR and CerbB2 expression was correlated with survival time (r = 0.147， 0.605， P&<0.05). Conclusions: Joint detection of ER， PR and CerbB2 expression can help to choose treatment and predict prognosis for breast cancer patients.
　　
　　［KEY WORDS］ Breast cancer；CerbB2；Estrogen receptor(ER)；Progesterone receptor(PR)；Prognosis

　　乳腺癌的发病率在我国呈逐年上升趋势，内分泌治疗在乳腺癌综合治疗中占有重要地位，乳腺癌组织中雌激素受体(estrogen receptor， ER)、孕激素受体(progesterone receptor， PR)的表达是指导内分泌治疗和判断预后的重要指标［1，2］，CerbB2基因的表达与乳腺癌的发生、发展与预后密切相关［3］。本文采用免疫组化方法，检测乳腺癌手术标本的石蜡包埋组织中CerbB2蛋白以及ER和PR的表达情况，旨在探讨癌基因蛋白，细胞增殖活性和激素受体与乳腺癌组织学分级及术后生存期的关系，为乳腺癌的诊断、预后及治疗提供可靠依据。

　　1 材料与方法

　　1.1 临床资料
　　
　　选择我院2002年1月～2007年1月收治的女性乳腺癌手术病例共253例，按发病时是否已绝经分为两组，其中132例为绝经前组（中位年龄43.5岁），121例为绝经组（中位年龄59.6岁）。病例入选标准：病理及随访资料完整，乳腺肿瘤完整切除，术前未行抗肿瘤治疗。121例绝经组患者中有89例接受了生存期随访，以抗癌治疗开始日（手术日期）为起始点，随访时间为5年以上，死亡病例均作死因调查，其中生存期为5年以上者72人，5年以下者17人。将89例绝经组患者依据WHO乳腺肿瘤组织学分类法进行分类：浸润性导管癌77例，非浸润性导管癌12例；伴有腋窝下淋巴结转移者30人，未转移者59人。

　　1.2 测定方法
　　
　　CerbB2、ER及PR测定采用免疫组织化学染色方法，所有病理标本均为常规石蜡切片病理定诊后行SP法免疫组化检测，DAB显色，以已知阳性标本做阳性对照，以PBS取代一抗做阴性对照。使用试剂盒购自福州迈新公司，操作步骤按试剂盒说明进行。

　　1.3 结果判定
　　
　　所有切片采用双盲观察。CerbB2在细胞膜或胞浆内出现棕黄色颗粒，ER、PR在细胞核内出现棕黄色颗粒。CerbB2阳性强度评分按照美国食品与药品检验局（FDA）推荐的 Hercept Test标准，由阳性细胞的比例和显色强度两方面决定，分－、+、++、+++四级，分级++～+++判定为阳性，－～+为阴性。ER、PR以细胞核内阳性肿瘤细胞数占同类细胞＞10％为阳性。

　　1.4 统计学处理
　　
　　运用统计学软件SAS 6.12处理数据，以χ2检验进行各参数的阳性率比较和相关性检验。P&<0.05为差异有统计学意义。

　　2 结果

　　2.1 两组乳腺癌之间CerbB2、ER、PR的阳性率比较
　　
　　CerbB2的阳性率在绝经前患者中较高，ER、PR的阳性率则在绝经后患者中较高，但两组之间三者的阳性率差异均无统计学意义（P均＞0.05），见表1。表1 绝经前组和绝经组CerbB2、ER、PR的阳性率比较（略）

　　2.2 CerbB2与ER、PR之间的关系
　　
　　在绝经前组，ER的阳性率在CerbB2阳性组中要显著低于CerbB2阴性组（P＜0.05），而CerbB2阳性和阴性两组中PR的阳性率则差异无统计学意义（P＞0.05）；在绝经组，CerbB2阳性组中ER、PR两者的阳性率均显著低于CerbB2阴性组（P＜0.05）。见表2。表2 CerbB2与ER、PR的关系（略）

　　2.3 绝经组乳腺癌预后多因素分析
　　
　　研究对象为绝经组中的89例患者。乳腺癌组织中ER、PR及CerbB2的表达和临床病理参数的关系：ER、PR表达均与组织分型无关（P＞0.05）；CerbB2的表达与组织分型有关（r为0.022， P＜0.05）。ER的表达与淋巴结转移无关(P＞0.05)；PR与淋巴结转移呈负相关（r=0.23，P&<0.05）；cerbB2与淋巴结转移呈正相关(r=0.605，P&<0.05)。89例标本中可统计5年以上生存者72例，其中ER的表达与生存时间无相关性(r=0.100，P &>0.05)； PR与CerbB2的表达与生存时间有相关性(r分别为0.147、0.605，P&<0.05)。见表3。表3 乳腺癌组织中ER、PR及CerbB2的表达和临床病理参数的关系（略）

　　3 讨论
　　
　　癌基因CerbB2是生长因子受体I型家族中成员之一。CerbB2膜受体是癌基因Her2编码的185RD的蛋白，是与乳腺癌关系最密切的一种癌基因。在乳腺癌CerbB2的膜表达是其癌基因扩增的结果，阳性表达多见于分化差和浸润性乳腺癌，此类患者往往对常规化疗不敏感，预后不良。Learn等人发现CerbB2激活较其他预后因子(包括ER、PR和肿瘤大小)有更大的价值，与最重要的预后因子转移淋巴结数目的价值相当［4］。CerbB2癌基因蛋白在乳腺癌发生中起重要作用，是乳腺癌发展进程中最有用的预后指标。CerbB2癌基因蛋白作为肿瘤分化差和预后不良的指标及化疗反应差的特征，它的高表达与乳腺癌发生的进程、转移的潜能呈正相关［5］。CerbB2原癌基因具有细胞内酪氨酸激酶样活性，可以促进细胞分裂和蛋白水解酶的分泌，并增强细胞的运动能力，从而促进肿瘤侵袭和转移口。CerbB2高表达与ER及PR激素受体阴性和腋窝组淋巴结阳性有关口，CerbB2表达阳性提示预后不良［68］。本研究中，乳腺癌中CerbB2的表达与淋巴结转移成正相关，与多数文献报道一致。除此之外，我们还发现，CerbB2的表达与组织学分型及术后生存期都有相关性，即非浸润型癌的阳性率高于浸润型，生存期＜5年的阳性率高于生存期＞5年。这与国内有的报道虽然有不一致，但是说明了CerbB2表达阳性与预后不良有着密切的关系。
　　
　　乳腺癌是一种激素依赖性肿瘤，激素受体的测定与乳腺癌内分泌治疗的疗效及预后有明确关系。根据激素受体的情况，有目的地选择内分泌治疗是十分重要的。ER阳性、PR阳性的乳腺癌被认为是真性激素依赖性肿瘤，即ER具有功能性。此类患者内分泌治疗有效率约为70％；ER阳性、PR阴性的乳腺癌一般认为ER为非功能性或雌激素的刺激不足以启动PR的合成，此类患者内分泌治疗有效率为55％～60％ ；ER阴性、PR阴性的乳腺癌对内分泌治疗不敏感，有效率一般不超过10％［4］。本研究表明，ER的表达在淋巴结转移、肿瘤组织病理学类型及生存期的差异无统计学意义(P&>0.05)，而PR的表达则和淋巴结转移及生存期有明显的相关性，PR的表达的阳性率越高淋巴结转移率越低、生存期＞5年的阳性率越高。这说明了ER、PR阳性者对内分泌治疗有效，预后好，这同很多文献报道的一致［7，8］。
　　
　　CerbB2与ER、PR之间的关系，多数报道显示呈负相关性［812］，但也有认为是正相关［13］，这可能与实验条件及研究对象（如未考虑绝经因素的影响）的选择有关。我们的分析结果显示，在绝经患者中，CerbB2与ER、PR均呈负相关性，即CerbB2阳性者中ER、PR阳性率更低；而在绝经前患者中，虽然CerbB2的表达与ER也呈负相关性，但却与PR无显著相关性。PR在绝经前和绝经后乳腺癌的发生、发展过程中是否存在机制上的差异，尚有待进一步的研究。

参考文献

　　1 裴劫，翟笃明．104例乳腺癌cerbB2、P53、ER、PR的表达及其临床意义［J］．中国试验诊断学，2007，10(11)：l3851387．

　　2 仇加高.乳腺癌中ECad、CerbB2、ER、PR的表达及其意义［J］.实用临床医药杂志， 2008，12(3): 106107.

　　3 袁勇，梁爱琳．120例乳腺癌中雌激素受体、孕激素受体及癌基因的表达与临床病理因素相关性分析［J］．现代肿瘤医学，2007，15(9)：12701272．

　　4 Learn PA，Yeh IT，McNutt M，et a1．HER2/neuexpression as a predictor of response to neo adjuvant docetaxel in patients with operable breast carcinoma［J］．Cancer，2005，103(11)：22522260．

　　5 董永红，吕云福，匡玉庭，等．乳腺癌c erbB2 DNA的预后价值［J］．第四军医大学学报，2002，23(21)：19331936．

　　6 刘静贤，高琨，刘毅强，等．乳腺癌CerbB2、p53、ER和PR表达及意义［J］．中国肿瘤临床与康复，2003，10(1)：1516．

　　7 杨丽芳，宋三泰，李晓兵，等．284例原发乳腺癌cerbB2蛋白的表达及其与预后的关系［J］．中华肿瘤杂志，2006，28(4)：294297．

　　8 张英，刘永源，黄应桂，等． 青年和绝经后女性乳腺癌cerbB2、p53、ER和PR受体表达及意义［J］．肿瘤防治研究，2004，31(2)：7980．

　　9 Lamy PJ，Verjat T，Paye M，et a1．NASBA：A novel approach to assess hormonal receptors and ERBB2 status in breast cancer［J］．Clin Chem Lab Med，2006，44(1):312.

　　10 仇丽红，史宏灿，钱建军，等.10荧光原位杂交和基因组半定量法检测乳腺癌组织中cerbB2基因扩增［J］.实用临床医药杂志，2007，11(6): 2731.

　　11 Lee A， Park WC， Yim HW， et a1．Expression of cerbB2， cyclin D1 and estrogen receptor and their clinical implications in the invasive ductal carcinoma of the breast［J］. Clin Oncol， 2007，37(9):708714.

　　12 钱建军，史宏灿，仇丽红，等.乳腺癌中cerbB2与HIF1基因表达相关性研究［J］.实用临床医药杂志，2009，13(1)：2833.

　　13 曹亚丽，吴晓波，王亿丽，等.乳腺癌组织中CerbB2、P53、PCNA、NM23蛋白的表达及其临床意义［J］.中国肿瘤临床与康复，2005，12(3):208211.