作者:王艳俊 程万宏 隗玉川
【摘要】目的 研究Livin基因在NSCLC中的表达和临床病理意义。方法 RT-PCR技术检测45例NSCLC组织中Livin mRNA的表达情况。结果 45例NSCLC组织中Livin mRNA阳性表达阳性率为71.1%。Livin基因表达与细胞学类型、分化程度、淋巴结转移及TNM分期均无相关(P&>0.05)。结论 Livin mRNA在NSCLC组织中高表达。
【关键词】非小细胞肺癌 Livin基因
细胞凋亡是体内清除衰老、退化和受损细胞的一个重要途径,一旦凋亡过程受到抑制,使基因发生突变的细胞得以生存和增殖,最终会导致肿瘤的发生[1]。目前关于Livin在肺癌中表达情况的报道甚少,为此,本实验采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测45例非小细胞肺癌组织(NSCLC)中Livin mRNA的表达情况,探讨Livin mRNA表达的差异性在非小细胞肺癌中的作用。
1 实验材料与方法
1.1病例资料及组织标本 45例NSCLC患者均为原发性肺癌,术前未接受过化疗或放疗治疗,术后均经病理学确诊,其中男31例,女14例,年龄22~75岁,平均48.5岁。对肺癌患者依据1997年新的修订标准进行TNM分期,其中Ⅰ期26例,Ⅱ期6例,Ⅲ期10例,Ⅳ期3例。病理形态学分型:鳞癌19例,腺癌21例,大细胞癌5例。组织分化程度:低分化癌32例;中、高分化癌13例。
1.2实验方法 RT-PCR 上游引物,5′-CATGGGTCTC
CGTCCTCG-3′;下游引物,5′-CAGGGAGCCCACTCT
CGT-3′。逆转录扩增反应条件:95℃ 2min变性;95℃ 1min,58℃ 1min,72℃ 1min,30个循环;最后72℃延伸7min。
1.3统计学处理 应用SPSS12.0软件进行统计分析,两样本率的比较用x2检验。
2 结果
RT-PCR检测NSCLC组织Livin mRNA表达情况。
45例NSCLC组织中Livin mRNA阳性表达阳性率为71.1%。
3 讨论
人类的Livin基因定位与染色体20q13.3,全长为1297nt。胞浆中的Livin以丝状形式存在,它含有一个杆状病毒凋亡抑制蛋白重复序列(BIR)分子和一个羧基端环指结构域(RING),RING结构域不参与抑制细胞凋亡作用,但对Livin在细胞内的合理分布具有重要的作用。Livin的BIR功能区是其发挥抗凋亡活性的必须结构[2]。
Ashhab等[3]用RT-PCR检测发现Livin在肿瘤细胞系中普遍表达。然而,国内外有关肺癌患者Livin表达情况及其与肺癌发生、发展﹑治疗和预后的报道甚少。本实验采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测45例非小细胞肺癌组织(NSCLC)中Livin mRNA的表达情况。结果显示:45例NSCLC组织中Livin mRNA表达阳性率为71.1%。Livin mRNA的表达与肺癌患者的病理分型﹑肿瘤分化程度﹑淋巴结转移及TNM分期均无明显相关关系。
由于Livinα和Livinβ两种亚型结构上的差异,体外研究发现它们也表现出不同的抗凋亡活性。Livinβ亚型发挥抗凋亡功能,Livinα促凋亡作用,推测两种亚型的不同表现可能与β亚型在BIR结构域及RING结构域间缺少18个氨基酸有关[4]。这需要对Livin在体内抑制细胞凋亡的机制以及两种亚型(Livinα,Livinβ)进行深入的研究。
参 考 文 献
[1]Vax DL, Korsmeyer SJ. Cell death in development.Cell, 1999,96:245-254.
[2]Deveraux GL, Reed JC. IAP family proteins suppressors of apoptosis. Genes Dev,1999,13:239-252.
[3]Gazzaniga P, Gradilone A, Giuliani L et al. Expression and prognostic significane of LIVIN, SURVIVIN and other apotosis-relateded genes in the progression of superficial bladder cancer. Ann Oncol, 2003,14(1):85-90.
[4]Tanaka K, Iwamoto S, Gon G,etal. Expression of Surviving and its relationship to loss of apoptosis in breast carcinomas. Clin Cancer Res,2000,6:127-134.