气相色谱法测定不同商品来源降香药材中挥发油和反式苦橙油醇的含量

　　　　　　 作者：李卓亚，唐春萍，梁生旺，尹永芹，沈志滨

【摘要】 目的 建立降香药材及降香挥发油中反式苦橙油醇的含量测定方法，并比较不同商品来源降香药材中降香挥发油及反式苦橙油醇含量。方法 采用气相色谱法，RTX-1701弹性石英毛细管柱(320 μm×15 m，0.25 μm)，以FID为检测器，内标为正十四醇。结果 降香药材中挥发油的含量为1.01%～2.70%，挥发油中反式苦橙油醇的含量为40.35%～53.30%，反式苦橙油醇在0.15～0.42 mg/mL范围内呈良好的线性关系，平均回收率为98.81%。结论 采用水蒸气蒸馏法提取降香挥发油和采用气相色谱法测定降香挥发油中反式苦橙油醇的含量，方法简便，可行；9个不同商品来源的降香挥发油的含量差别较大，挥发油中反式苦橙油醇的含量也有差别。

【关键词】 降香；挥发油；反式苦橙油醇；含量测定

　　Abstract:Objective To develop a GC method for analyzing dnerolidol and volatile oil in Ligunm Dalbergiae Odoriferae from different origins. Methods Samples were analyzed on a RTX1701 (320 μm×15 m， 0.25 μm) column by using FID as the detector and 1tetradecanol as internal standard．Results Content of volatile oil in Ligunm Dalbergiae Odoriferae was 1.01%-2.70%， and the content of dnerolidol was 40.35%-53.30%. dnerolidol had a good linearity in the range of 0.15-0.42 mg/ml， and the average recovery was 98.81%.Conclusion Contents of the volatile oil and dnerolidol in Ligunm Dalbergiae Odoriferae varied with origins.

　　Key words:Ligunm Dalbergiae Odoriferae；volatile oil；dnerolidol; content determination

　　中药降香（Ligunm Dalbergiae Odoriferae）为豆科植物降香檀（Dalbergia odorifera T.Chen）树干和根的干燥心材，具有行气活血、止痛止血之功效［1］。中国药典2005版一部仅采用薄层色谱法对降香药材进行定性鉴别，有文献报道采用HPLC法对不同产地降香挥发油中反式苦橙油醇的含量进行测定［2］，为降香药材的质量控制提供了参考标准。本实验在

参考文献

的基础上，采用水蒸气蒸馏法提取降香挥发油，测定不同商品来源降香药材的出油率，并同时测定挥发油中反式苦橙油醇的含量，为进一步控制降香药材的质量提供依据。

　　1 仪器与试剂
　　
　　岛津(Shimadzu)GC2010气相色谱仪，FID检测器。
　　
　　降香药材：分别购于山东、黑龙江、江西、贵州、广东，经广州市药材公司周路山主任中药师鉴定为豆科植物降香檀树干和根的干燥心材；苦橙油醇（Sigma公司，顺反异构混合液，纯度>98%，批号sigmah59605）；正十四醇（色谱纯，天津市大戟化学试剂厂）；无水乙醇、石油醚均为分析纯。

　　2 方法与结果

　　2.1 色谱条件
　　
　　RTX1701气相色谱柱(320 μm×15 m，0.25 μm)，进样口温度230 ℃，分流比为5∶1，流动相高纯N2（99.999%），正十四醇为内标，FID检测器，进样量2 μL，检测器温度250 ℃，流速2　mL·min-1。
　　
　　升温程序：初始温度100 ℃，以2 ℃·min-1速度升温到124 ℃，保持10 min；以10 ℃·min-1速度升温到138 ℃，保持5 min；以20 ℃·min-1速度升温到220 ℃，保持5 min。色谱图见图1。

　　2.2 溶液的制备

　　2.2.1 不同商品来源降香挥发油的制备

　　分别取9个不同商品来源的降香药材适量，粉碎，过40目筛，分别取过筛后药材粗粉150　g，置2 000　mL圆底烧瓶中，加8倍量水、浸泡5 h，挥发油提取器提取6　h［3］，无水Na2SO4干燥，离心，即得降香挥发油。

　　2.2.2 内标溶液的制备

　　精密称取内标十四醇99.0 mg，置100 mL量瓶中，加入无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得内标溶液（0.990 mg·mL-1），置4 ℃冰箱保存。

　　2.2.3 对照品溶液的制备

　　精密称取苦橙油醇对照品119.0 mg，置100 mL量瓶中，加入石油醚溶解并稀释至刻度，摇匀，即得苦橙油醇对照品溶液（1.190 mg·mL-1），用面积归一化法测定其中反式苦橙油醇的含量为61%，故对照品中反式苦橙油醇的浓度为（0.726 mg·mL-1），置4 ℃冰箱保存。

　　2.2.4 样品溶液的制备

　　分别精密称取“2.2.1”项下制备的9个不同商品来源的降香挥发油150.7、153.5、149.5、153.8、150.6、152.6、154.5、153.2、152.6 mg，分别置9个100 mL量瓶中，以石油醚定容到刻度，摇匀，编号，即得。

　　2.3 标准曲线的绘制
　　
　　精密量取“2.2.3”项下配制的对照品溶液1.0、1.5、2.0、2.5、2.9 mL于5 mL量瓶中，分别加入1.5 mL内标溶液，石油醚溶解并定容至刻度，摇匀，照“2.1”项下色谱条件进样，以反式苦橙油醇质量浓度为横坐标（X），以反式苦橙油醇峰面积与内标峰面积之比为纵坐标（Y），绘制标准曲线，得回归方程：Y=3.633X-0.057（r=0.999 9），线性范围：0.146～0.420 mg·mL-1。

　　2.4 精密度试验
　　
　　精密量取“2.2.3”项下制备的对照品溶液2.0 mL，置5 mL量瓶中，加入1.5 mL“2.2.2”项下制备的内标溶液，石油醚溶解并定容至刻度，摇匀，照“2.1”项下色谱条件重复进样5次，反式苦橙油醇与内标峰面积比的RSD为0.67%，表明仪器精密度良好。

　　2.5 稳定性试验
　　
　　精密量取“2.2.4”项下制备的“1”号降香挥发油溶液1.5 mL，置5 mL量瓶中，准确加入“2.2.2”项下制备的内标溶液1.5 mL，石油醚定容至刻度，摇匀，照“2.1”项下色谱条件下分别在0、3、6、12、24 h进样测定，结果RSD值为0.85%，表明供试品溶液在24 h内稳定。

　　2.6 重复性试验
　　
　　精密量取5份“2.2.4”项下制备的“1”号降香挥发油溶液1.5 mL，置5 mL量瓶中，分别加入1.5 mL“2.2.2”项下制备的内标溶液，石油醚溶解并定容至刻度，摇匀，照“2.1”项下色谱条件进样测定，RSD值为1.01%。

　　2.7 加样回收率试验
　　
　　精密量取5份1.5 mL“2.2.2”项下制备的内标溶液分别置5 mL量瓶中，分别精密加入0.8 mL“2.2.4”项下制备的降香挥发油溶液“1”，分别加入“2.2.3”项下制备的对照品溶液0.7、0.8、0.9、1.0、1.1 mL，石油醚稀释至刻度，摇匀，照“2.1”项下色谱条件进样测定，计算得平均回收率为98.81%，见表1。表1 反式苦橙油醇加样回收率试验结果（略）

　　2.8 不同商品来源降香中反式苦橙油醇的含量测定
　　
　　分别取“2.2.4”项下配制的9个不同商品来源的样品溶液各1.5 mL，分别置9个5 mL量瓶中，分别加入内标溶液1.5 mL，石油醚溶解并定容至刻度，摇匀，测定，结果见表2。

　　从表2可见，9个不同商品来源降香药材中挥发油的提取率最高为2.70%；最低为1.01%，差别较大；挥发油中反式苦橙油醇的含量最高为53.03%，最低为40.35%。表2 不同商品来源降香药材挥发油及反式苦橙油醇含量测定结果（略）

　　3 讨论
　　
本文结果表明，9个不同商品来源的降香挥发油的含量差别较大，挥发油中反式苦橙油醇的含量也有差别。在本文实验的基础上，作者对10个厂家生产的含有降香药材的香丹注射液进行了反式苦橙油醇含量的测定，结果显示2个厂家的产品均未检出反式苦橙油醇，并且各产品之间，反式苦橙油醇的含量差别也有10倍之多，相关研究正在进行中。
　　
　　因此，在临床及中药复方制剂选用降香时，应尽量选择来源稳定、质量可控的道地药材，并对其挥发油和反式苦橙油醇的含量同时进行测定，以此控制降香及其复方制剂的质量，保证临床疗效。

参考文献

　［1］国家药典委员会．中华人民共和国药典：2005版一部［M］.北京：化学工业出版社，2005：158.

　　［2］梁汉明，郭晓玲，冯毅凡，等.HPLC法测定不同产地降香中橙花叔醇的含量［J］.药物分析杂志，2007，27(3):361-363.

　　［3］李奉勤，田志国，史冬霞，等.正交试验探讨降香挥发油的最佳提取条件［J］.中国实验方剂学杂志，2004，11(4):23-24