不同检测系统IgG测定结果的可比性研究

【摘要】 目的 探讨同一临床实验室不同检测系统间免疫球蛋白G(IgG)测定结果是否具有可比性，为免疫球蛋白G测定的标准化提供实验数据。方法 参考NCCLS的EP9A文件，以德灵BNⅡ(仪器编号MY05)特定蛋白分析仪、德灵原装试剂、德灵校准品和德灵质控品组成的检测系统(已通过ISO15189实验室认可)为比较方法，以德灵BNⅡ(仪器编号MY19)特定蛋白分析仪、德灵原装试剂、德灵校准品和德灵质控品组成的检测系统为实验方法，用患者新鲜血清对IgG进行检测，计算试验方法(Y)和比较方法(X)之间的相对偏差(SE%)，以CLIA'88规定的室间质量评价允许误差范围的1/2为标准，判断不同检测系统的可比性。 结果 IgG测定结果各系统的误差临床可以接受。 结论 各检测系统测定IgG结果具有可比性。当同一实验室同一检验项目存在2个以上的检测系统时，应进行方法比对和偏差评估，以保证检验结果的可比性。

【关键词】 免疫球蛋白类; 检测; 比对试验

　　【Abstract】 Objective To investigate the comparability of immune globulin G (IgG) measurement results among different detection systems in the same clinical laboratory so as to provide experimental data for IgG standardization.Methods Based on NCCLS EP9A documents， the study took Dade Behring BNII specific protein analyzer (Instrument No. MY05)， Dade Behring original reagent， Dade Behring calibration products and Dade Behring quality control product composition detection system (having passed the ISO15189 Laboratory Accreditation)as comparison means; Dade Behring BNII specific protein analyzer (Instrument No. MY19)， Dade Behring original reagent， Dade Behring calibration products and Dade Behring quality control product composition detection system as means of experiment. Patients' fresh serum was adopted to test IgG. The relative deviation (SE%)between the test method (Y) and the comparative method (X) was calculated， with 1/2 permissible error range of CLIA88 EQA as the standard， to determine the comparability of different detection systems.Results The IgG detection errors from various systems could be clinically accepted.Conclusion The IgG results from various detection systems are comparable in nature. When more than two detection systems are available in the same detection program in the same laboratory， methods should be compared and deviation assessed in order to ensure the comparability of the test result.

　　【Key words】 Immune globulins; Detection; Comparison experiment

　　IgG是血清主要的抗体成分，最常用的检测方法是散射比浊法和透射比浊法。德灵BNⅡ特定蛋白分析仪的检测方法是终点散射比浊。本实验室现有2台BNⅡ特定蛋白分析仪，其检测结果的一致性如何，笔者对此进行了比较观察，现将结果报告如下。

　　1 材料与方法

　　1.1 材料 仪器和试剂：检测系统1：德灵BNⅡ(仪器编号MY05)特定蛋白分析仪、德灵原装试剂、德灵校准品和德灵质控品组成的检测系统。检测系统2：德灵BNⅡ(仪器编号MY19)特定蛋白分析仪、德灵原装试剂、德灵校准品和德灵质控品组成的检测系统。标本来源:本院门诊及住院患者新鲜随机血清标本。

　　1.2 方法 (1)比较方法：德灵BNⅡ(仪器编号MY05)特定蛋白分析仪检测系统通过ISO15189实验室认可，故其作为比较方法。(2)试验方法：德灵BNⅡ(仪器编号MY19)特定蛋白分析仪检测系统作为试验方法。按照相关的SOP 的要求，进行IgG的检测。(3)样本测定方法：共检测新鲜随机血清标本40份。每天检测8份随机样本，分别用两检测系统正向(编号18)检测，再以反向(编号81)分别测定，5 d完成。

　　1.3 数据处理 (1)离群值检查：检查每一方法内双份测定值有无离群表现。以4倍的各方法差值的均值为判断限，各方法内的成对差值都应在限值内，说明双份测定结果符合要求。(2)数据作图：检查X、Y关系实验点有无离群表现：先看图有无明显离群点。若有，应对X、Y配对值作离群值计算。以4倍的平均差值为判断限，所有差值都不应超出限值。散点图：Y轴为试验方法每样本双份测定的均值;X轴为对比方法每样本双份测定的均值。(3)检查标本内分析物含量分布是否适当：作为对比方法，理论上要求应该没有误差，只有这样回归分析的结果才有效。但在临床实验室这是不可能达到的，因为每个测定都有其固定误差，Ep9A 文件指出，如果对比方法的取值范围有足够宽，对比方法的这种误差在回归分析中可忽略不计，并可用相关系数(r) 来粗略估计对比方法取值范围是否足够宽。r的因素一是实验点和回归线的离散程度，一是分析物含量分布宽度。一般要求r≥0.975或r2≥0.95，认为X范围是合适的。(4)计算线性回归方程:试验方法Y=bX+a;(5)计算方法间的系统误差:将给定的医学决定水平浓度Xc代入回归方程，计算试验方法(Y)与比较方法(X)之间的绝对偏差(SE)，SE=|YcXc|，相对偏差SE%=SE/Xc×100%。(6)检测系统可接受性能的评价：以检测系统1作为目标检测系统，将IgG医学决定水平代入回归方程，用以判断检测系统的可接受性能。以CLIA′88对室间评估的允许误差为判断依据，由方法学比较评估的SE%≤1/2 CLIA′88属临床可接受水平，即不同检测系统间的测定结果具有可比性。

　　1.4 统计学方法 所有实验数据采用SPSS13.0统计软件分析处理。

　　2 结果

　　2.1 离群值检查 见表1。表1 离群值检查

　　2.2 数据作图 见图1。

　　图1 不同检测系统检测IgG结果散点图2.3 比较方法(X)测定范围的检验 r2 =0.986。

　　2.4 回归方程 检测系统2以检测系统1作为目标检测系统 ，得到回归方程：Y=0.996X+0.038。

　　2.5 检测系统可接受性能的评价 见表2。

　　3 讨论

　　临床实验室不断向自动化、标准化方向发展。一些实验室可能应用不同的检测系统对相同项目进行检测，为保证表2 检测系统可接受性能评价

　　参数结果n40r20.986b0.996a0.038Xc(g/L)20Yc(g/L)19.958SE0.042SE%0.21可接受性能25%最大总误差(g/L)5结论可接受

　　检测结果的一致性，“ISO15189 (医学实验室质量和能力的专用要求)”及“临床实验室管理办法”要求：“当同样的检验应用

　　不同程序或设备，或在不同地点进行，或以上各项均不同时，应有确切机制以验证在整个临床适用区间内检验结果的可比性。应按适合于程序和设备特性的规定周期验证”[1]。想要实现同一检验项目在不同检测系统检验结果的可比性，是实验室质量管理的最终目标[2]。

　　我们按照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9A文件的要求[3]，对实验室BNⅡ特定蛋白分析仪进行血清IgG的检测的不同检测系统进行比对和偏差评估，我们使用的是配套检测系统，即仪器、试剂、标准品、质控品均来源于德灵公司。分析结果表明，实验室血清IgG检测结果在不同的BNⅡ特定蛋白分析检测系统之间有良好的相关性，相对偏差小于1/2 CLIA′88的允许范围，在分析范围内相对偏差临床可以接受。

　　通过对两套检测系统的比对分析，我们对检测结果在两分析系统间的偏倚有了明确的了解和准确的评估，保证了同一实验室检测结果的一致性和可比性。

　　总之，根据NCCLS 有关指南文件Ep9A对实验室BNⅡ特定蛋白分析仪进行血清IgG的检测的不同检测系统进行比对和偏差评估，r2 =0.986，回归方程：Y=0.996X+0.038，相对偏差SE%=0.21，在分析范围内相对偏差临床可以接受。实验方法测定结果在比较范围内的相对偏差均小于1/2 CLIA′88的允许范围[4]。

参考文献

　[1] 魏 昊，丛玉隆.医学实验室质量管理与认可指南[M].北京：中国计量出版社，2004：7275.

　　[2] 丛玉隆，冯仁丰，陈晓东，等.临床实验室管理学[M].北京：中国计量出版社，2004： 111114.

　　[3] National Committee for Clinical Laboratory Standards. Method comparison and bias estimation using patient samples[S];Wayne Aps，EP92A ，NCCLS，1986:1.

　　[4] 张秀明，庄俊华，徐 宁，等.不同检测系统血清酶测定结果的偏倚评估与可比性研究[J].中华检验医学杂志，2006，29(4):346349.